大豆腺苷酸激酶基因GmADK的克隆与表达分析-论文.pdf

《大豆腺苷酸激酶基因GmADK的克隆与表达分析-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、作物学报ACTAAGRONOMICASINICA2013，39(10)：1739—1745http：／／zwxb．chinacrops．org／ISSN0496—3490；CODENTSHPA9E-mail：xbzw@chinajourna1．net．cnDoI：l0．3724／SJ．1006．2013．01739大豆腺苷酸激酶基因GmADK的克隆与表达分析盖江涛赵团结李艳盖钧镒南京农业大学大豆研究所／国家大豆改良中心／农业部大豆生物学与遗传育种重点实验室／作物遗传与种质创新国家重点实验室江苏南京210095摘要：腺苷酸激酶(

2、adenylatekinase，ADK)催化ATP+AMP口2ADP的可逆反应，是维持细胞能量动态平衡的关键酶，在植物中参与调节生长发育和逆境应答等过程。目前有关大豆ADK的研究还未见报道。本文通过RT-PCR方法，从耐盐大豆品种南农1138．2的叶中克隆到一个腺苷酸激酶基因，命名为GmADK。GmADK的编码区序列(codingDNAsequence，CDS)长804bp，编码267个氨基酸。预测其蛋白结构含有典型的腺苷酸激酶功能域ATP．AMP(Ap5A)结合位点和AMP结合位点。蛋白序列比对和进化树分析表明，大豆与菜豆(

3、Phaseolusvulgaris)和蒺藜苜蓿(Medicagotruncatula)中的ADK序列相似性最高，亲缘关系最近。组织表达显示GmADK基因的表达量在大豆叶和根中高于茎中。荧光定量PCR分析表明GmADK的表达受盐胁迫的调节，且在耐盐(南农1138．2)和盐敏感(科丰1号)品种间存在差异。在叶和根中，200mmolLNaC1处理6、12和24h后，GmADK的表达量在盐敏感品种中比未处理对照有所降低，但在耐盐品种中却比未处理对照升高，因此推测GmADK可能参与大豆对盐胁迫的响应。关键词：大豆(Glycinemax[

4、L．]Merr．)；腺苷酸激酶；基因克隆；盐胁迫CloningandExpressionAnalysisofanAdenylateKinaseGeneGmADKinSoybeanGAIJiang—Tao，ZHAOTuan—Jie，LIYan，andGAIJun—YiSoybearlResearchInstitute／NationalCenterforSoybeanImprovement／MOAKeyLaboratoryforBiologyandGeneticImprovementofSoybean(Genera1)／Natio

5、nalKeyLaboratoryofCropGeneticsandGermplasmEnhancement，NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095，ChinaAbstract：Adenylatekinase(ADI()isanimportantenzymeincellularenergyhomeostasis，whichcatalyzestheinterconversionofadeninenucleotides，ATP+AMP[]2ADEandisinvolvedinmanyp

6、rocessesincludingplantgrowth，developmentandresponsetoabioticstresses．Todate，therehasnoreportoncloningandexpressionanalysisofsoybeanADKgeneyet．Inthisstudy,asoybeanADKgenewasclonedfromthe1eavesofasalttolerantcultivarNNl138．2usingIPCR．andwasdesignatedasGmAD_(．Thecoding

7、sequence(CDS)ofthisclonedADKgeneis804bpinlength．encodingapolypeptideof267aminoacids．Itsproteinwaspredictedtobelocatedinplastids，containingatypicalATP-AMP(ApSA)bindingsiteandanAMPbindingsite．Multiplese-quencealignmentsandphytogeneticanalysisofADKproteinsshowedGmADKis

8、mostsimilarwithADKfromPhaseolusvul-garisandMedicagotruncatula．TissueexpressionpatternofGmADKshoweditsmRNAwasmoreabundantinsoybeanrootsandl