广西巴马小型猪GHRH成熟肽真核表达质粒对小鼠生长效应的影响.pdf

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1、南方农业学报JoumalofSouthemA鲥culture2014，45(12)：2264—2269ISSN2095—1191：CODENNNXAABhttp：，／、Ⅲw．Ilfny)￡b．cnDOI：10．3969／j：issn．2095一1191．2014．12．2264广西巴马小型猪GHRH成熟肽真核表达质粒对小鼠生长效应的影响李芳芳·，郭亚芬”，兰干球2，潘堂峰3(1广西畜禽品种改良站，南宁53000l；2广西大学动物科学技术学院，南宁530005；3南宁高新技术产业开发区动物卫生监督所，南宁530005)摘要：【目的】探讨广西巴马小型猪促生长激素释放激素(G咖)成熟

2、肽真核表达质粒对小鼠生长效应的影响，为进一步研究广西巴马小型猪GⅢm成熟肽的促生长作用及a积H基因疫苗的高效制备与安全使用提供参考依据。【方法】利用基因重组技术将广西巴马小型猪a珊碱熟肽序列与pEGFP．N1质粒连接构建重组真核表达质粒，然后按O．5斗晚的剂量肌肉注射经25％蔗糖溶液预处理的小鼠，观察记录小鼠体重变化情况，并分别提取重组质粒注射组小鼠的心脏、肝脏、肾脏及注射部位肌肉DNA，再以PcR检测是否存在基因质粒残留。【结果】以构建的pEGFP．GHRH重组质粒注射小鼠后，其外源回碱熟肽DNA可在肌肉中获得表达，但并未整合入小鼠基因组中。虽然重组质粒注射组小鼠的末重与空质

3、粒注射组小鼠的差异不显著(P>o．05)，但在注射后的Io～25d，重组质粒注射组小鼠体重均显著高于空质粒注射组(P<0，05)。在相对日增重率方面，注射后的前15d内，重组质粒注射组小鼠的相对日增重率均高于空质粒i辛射组。【结论】构建的广西巴马小型猪pEGFP．GJ积遁组质粒能在一定时间内促进小鼠生长，即GHRH种属差异性小，在动物中有较高的保守性。关键词：广西巴马小型猪；促生长激素释放激素(GHRH)成熟肽序列；小鼠；真核表达质粒；生长效应中图分类号：S828．89文献标志码：A文章编号：2095—119l(2014)12—2264一06Eukaryoticexpressi

4、onplasmidofGHRHmatureDeDtideEUKaryonCeXpreSSlonDIaSmln0tb上U}【HmatUreDeDtldefromGuangxiBamaMini—piganditsinnuence0nmousegrowthef

5、fectLIFang—fan91，GU0Ya—fen2+，LANGan—qiu2，PANTang—feng3(1Guan群iWorkStationofLivestock&PoultryBreedImpmvement，Nanning530001，China；2CoUegeofAnimalScienceandTcchnology，

6、GuangxiUniversity，Nanning530005，China；3AnimalHealthSupervisionInstitufeofNew＆High．techIndustrialDevelopmentZone，Nanning530005，China)Abstract：【0bjecIive】Thepresentexperimentwasconduccedtoinvestigatetheinfluenceofmaturepeptideeukary—oticexpressionplasmidofgrow山ho珊onereleasingho瑚one(GHRH)inGuan

7、鲥B哪aMini—pigonmousegr0讪ef．fect，inorderloprovidereferenceforresearchingthepromotinggrowtheffectofGHRHmaturepeptideonGuan铲iBa—maMini—p培，ande蚯cientpreparationandsafetyuseofGHRHgenevaccine．【Method】Byusinggenerecombinationtechnique，theGⅣRHmaturepeptidesequenceofGuang弭iBamaMini—pigwaslinkedintopla

8、smidpEGFP—N1tocon—stnlctrecombinanteukaryoticplasmidpEGFP—GHRH．Themousepre眦atedwith25％sugarsolutionwastreatedwithintmmusculariniectionwithdoseof0．5¨g坛plasIIlidtorecordtheirweight．Meanwhikailningatmiceininjec“ongroupofrecombinantplasmid，theDNAofthei