广西巴马小型猪PAQR3基因克隆及表达谱分析.pdf

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1、南方农业学报JournalofSouthernAgnculture2016，47(8)：1390—1395ISSN2095一l191：CODENNNXAABDOI：10．3969／j：issn．2095一l191．2016．08．1390广西巴马小型猪PAQR3基因克隆及表达谱分析司景磊，黄碉萌，李龙，陈秋明，严雪瑜，吴延军，张笠，蒋钦杨，兰干球，郭亚芬+(广西大学动物科学技术学院，南宁530005)摘要：【目的】克隆广西巴马小型猪孕激素和脂联素分子受体3(PAQR3)基因，并研究该基因在广西巴马小

2、型猪不同组织中的表达特性，为揭示PAQR3的功能及其在疾病模型中的作用打下基础。【方法】采用RT—PCR扩增广西巴马小型猪PAoR3基因，应用在线预测软件对其功能和结构进行生物信息学分析，并FXqRT．PCR分析PAQR3基因在不同组织中的表达特性及高脂高糖诱导后的表达水平。【结果】广西巴马小型猪PAQj髓基因编码区(cDs)序列全长936bp，编码312个氨基酸，与人类(xM006714106．2)、猕猴(NM001257693．1)、牛(xM010806259．1)、家犬(xM014109889

3、．1)、家鼠(XM006534874．2)、羊(删012180242．1)、鸡(XM001233720．3)PAQR3氨基酸序列的一致性在8l％以上，其中与猕猴的亲缘关系最近，与牛的亲缘关系相对较远。PAQR3蛋白氨基酸序列包含保守的HlyIII结构域，为亲水性蛋白，有7个跨膜螺旋结构；其二级结构主要是延伸链，占31．83％；该蛋白不存在信号肽，不属于分泌蛋白。qRT．PCR分析结果表明，PAQR3基因在广西巴马小型猪的不同组织中均有表达，以在肺脏中的表达量最高、脂肪中的表达量最低；经高脂高糖诱导后

4、，PAQR3基因在广西巴马小型猪肝脏组织中的表达水平显著降低(艮O．05)。【结论】PAQR3基因在广西巴马小型猪不同组织中广泛表达，在胆固醇和甘油三脂充裕的条件下，机体可通过下调PAQR3基因的表达量来平衡胆固醇含量。关键词：广西巴马小型猪；PAQR37ff[；因；克隆；表达谱分析中图分类号：$828．89文献标志码：A文章编号：2095一1191(2016)08—1390—06Clq"gand。parerlisanalysisofGuang"lomnt：andexpresslonatternsa

5、nalysisOttiuan群aB。"pigPAQR3anlanum-o—geneBSIJing-lei，HUANGYue—meng，LILong，CHENQiu-ming，YANXue-yu，WUYan-jun，ZHANGLi，JIANGQin-yang，LANGan-qiu，GUOYa-fen’(ColegeofAnimalScienceandTechnology，GuangxiUniversity，Nanning530005，China)Abstract：【Objectivel卟epresen

6、texperimentwasconductedtocloneprogesteroneandadipoQreceptor3(PAQR3)geneofGuangxiBamamini—pigandinvestigateitsexpresssionindifferenttissuesofGuangxiBamamini-pig，inordertolayafoundationforrevealingPAQR3fuctionanditsroleindiseasemodels．【Me山odlThePAQR3gene

7、ofGuangxiBamamini—pigwasclonedbyRT—PCR，theproteinstructureofporcinePAQR3wasanalyzedbasedonbioinformaticsusingon-linepredictionsoftware．ThePAQR3geneexpressionImtternindifferenttissuesanditsexpressionlevelafterbeingin—ducedbyhighfatandhighsugarweredetect

8、edbyqRT—PCR．【Result]Theresultsshowedthat，tllePAQR3geneofGuangxiBamamini—pigWas936bpinlength，encoding312aminoacids．nephylogenetictreeanalysisshowedthat，andtlleaminoacidsequenceofporcinePAQR3proteinsharedidentityofmoretlIall81％withhuman(X