高剂量pGRF基因质粒对猪生长的影响

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1、四川农业大学硕士学位论文高剂量pGRF基因质粒对猪生长的影响姓名：王立志申请学位级别：硕士专业：动物营养与饲料科学指导教师：王康宁20030601摘要本试验研究了注射高剂量pGRF基因质粒对猪生长的影响．以期证明其在养猪生产上的使用安全性。试验采用单因子试验设计，将56头杜×长×大三元杂交断奶仔猪，按体重、性别和遗传特性一致的原则配对为8个组(起始平均体重7．82+0．26公斤)，随机分为4个处理，每个处理2个重复，每个重复7头猪。4个处理分别为(1)空白对照组；(2)第一天注射3mgpGRF基因质粒，45天后注射3mg生理盐水：(3)第一天注射3mgpGRF基因质粒，45天后再注射3

2、mg质粒：(4)第一天注射3mgGRF基因质粒，45天后再注射6mg质粒。试验期间记录增重和采食情况，到150天时结束饲养试验，每个处理选择8头猪进行放血屠宰。屠宰前前腔静脉空腹采血20毫升，所采血样分成三份．分别用于测定血液中的常规指标、血清中的生化指标和血浆中的激素含量。屠宰后取心、肝、脾、肺和肾各一块用于制作组织切片；另取心、肝、脾、肺、肾、注射质粒部位肌肉和非注射部位肌肉(背最长肌)各一块用于检测质粒的残留。试验结果表明：各处理组全期生产性能与对照组相比，注射3mg使ADG、ADFI、F／G分别增加0．84％、4．23％和3．37％，但差异不显著(p>O．05)；注射6mg可以

3、使ADG、ADFI和F／G分别下降3．2％、4．59和1％0>0．05)；注射9mg使ADG下降4．62％，F／G升高4．71％fg>o．05)。总趋势是注射高剂量pGRF基因质粒抑制动物的生长速度，剂量越高抑制效果越强。注射3mg和6mg使猪肝脏的器官系数显著下降(p<0．05)，对其它器官和功能没有产生不良影响：注射9mg使血小板数极显著地减少(p<0．01)，血清肌酐含量显著升高O<0．05)，还会使肝脏和肾脏产生广泛的颗粒变性。注射pGRF基因质粒对肉质有一定的改善作用，对胴体品质没有显著的影响(p>O．05)。试验结束时各处理组血浆GH、GRF、SS都回落到了正常水平，与对照

4、组的差异不显著(p>O。05)。3mg组和6mg组一tb、肝、脾、肾、注射部位肌肉、非注射部位肌肉质粒的残留量为0；9mg组的残留仅能在注射部位肌肉中检测到，总量仅相当于当初注射量的0．00014％。综合各项试验结果，6mg以下注射剂量的pGRF基因质粒在养猪生产上的使用是安全的。关键词：猪猪生长激素释放因子基因质粒安全性前言当今世界人口的增长与人类可利用资源的日益匮乏形成的矛盾，促使着动物营养学家们不断地探索，以期用最小的成本生产出最多的动物产品。而过去几十年国内、国外的实践表明人们在追求动物高产的同时却导致了肉品品质的下降，有的甚至对人的健康构成威胁。随着人们对无公害肉品的追求，动

5、物营养学家在采用各种方法促进动物生长的同时，还必须确保所生产的肉品安全、无污染。动物的生长是一个复杂的生理、生化过程，它不仅受到遗传、环境、营养的影响，同时还受下丘脑．垂体-靶腺组成的神经内分泌生长轴的调控。在动物的生长轴中生长激素处于中心位置，在调节动物的生长中具有重要的作用。自从Baird(1952)发现注射GH对猪生长具有促生长作用的50多年以来，通过调控生长激素以促进动物生长的方法已经有：直接注射外源生长激素、注射外源生长激素释放因子、生长抑素免疫中和以及培育转GH或GRF基因动物。但这些方法都存在着不同程度的缺陷。通过注射pGRF基因质粒来调控动物内源生长激素的分泌．以达到促

6、进动物生长的目的，是近年来采用的一种新的方法，与以往的方法相比，它具有操作简单、容易推广等优点。初步的试验结果已经表明注射pGRF基因质粒能促进猪的生长，改善猪的胴体品质．对内脏器官也没有造成肉眼所能观察到的损伤。但是是否会造成内脏器官肉眼不能观察到病理变化．是否会造成血液性状异常．到出栏时体内是否有质粒的残留还没有见到报道。而且以往试验探讨的是pGRF基因质粒适宜的注射剂量，使用的剂量相对较低，为了充分证明其在生产上使用的安全性，有必要就高于适宜注射剂量的pGRF基因质粒对动物生长的影响作进一步的研究。针对以上问题，本试验拟对瘦肉型猪注射高于适宜剂量的pGRF基因质粒，研究它对生产性

7、能、肉质、胴体品质、血液常规指标、血液生化指标、血液相关激素水平的影响．检测内脏器官的病理变化和肉品中的质粒残留，-以进一步证明pGRF基因质粒在养猪生产上使用的安全性。’1．文献综述1．1生长轴与动物生长调控生长轴是动物体内从下丘脑一垂体一靶器官山一系列激素及其受体所组成的神经内分泌系统。在生长轴中生长激素(GH)处于中心位置，是调节动物生长最重要的激素。GH是由下丘脑分泌的一种多肽类激素，它的分泌除了受年龄、性别、营养等因素的影响外，还受到