农杆菌介导的葡萄柚转化再生体系建立研究.pdf

《农杆菌介导的葡萄柚转化再生体系建立研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、南方农业学报JOURNALOFSOUTHERNAGRICULTURE2013，44(7)：1081—1086ISSN2095—1191；CODENNNXAABhttp：／／www．nfnyxb．eliDOI：10．3969／j：issn．2095—1191．2013．7．1081农杆菌介导的葡萄柚转化再生体系建立研究韩美丽1，陆荣生1，林睿2，马跃峰1，杨玉霞1，覃建林1(1广西农业科学院植保所／广西作物病虫害生物学重点实验室，南宁530007；2广西医科大学，南宁530001)摘要：【目的】建立邓肯葡萄柚上胚轴遗传转化再生体系，为葡萄柚基因转化研究奠定基础。【方法】以邓肯

2、葡萄柚上胚轴为外植体，研究上胚轴不定芽和生根诱导、遗传转化的影响因子。【结果】在添=cJIITDZo．50～1．00mg／L的培养基上，上胚轴不定芽诱导率为72．7％～81．6％；无菌枝条的最适生根条件为1／2MT添加ABT6号1．0meCL，生根率可达81．3％。不同抗菌素中，以替门汀杀菌效果较好，且对外植体出芽无明显抑制作用。转化芽选择初期，5～7d的暗培养有利于卡那霉素抗性芽的诱导发生。PcR检测结果显示，7株抗性植株中有6株呈阳性。【结论】建立了邓肯葡萄柚上胚轴植株再生繁殖体系，为其基因转化奠定了基础。关键词：葡萄柚；不定芽；再生；转化中图分类号：$666．3文献标

3、志码：A文章编号：2095—1191(2013)07—1081—06EstablishmentregenerationsystemforCitrus．paradisiMacf．CVDuncanbyAgrobacterium-mediatedtransformationHANMei—lil，LURong—sheng1，LINRui2，MAYue-fen91，YANGYu-xia',QINJian-linl(1PlantProtectionResearchInstitute，GXAAS／GuangxiKeyLaboratoryofBiologyforCropDiseasesan

4、dInsectPests，Nanning530007，China；2GuangxiMedicalUniversity，Nanning530021，China)Abstract：【Objective】TransformationregenerationsystemofepicotylsderivedfromCitrusparadisiMacf．CVDuncanseedlingwereestablishedinordertoprovideusefulreferenceforitsgenetransformation．【Method】Epicotylsofseedlingwere

5、usedasexplantstoinvestigatetheinfluencefactorsoninductionanddifierentiationofadventitiousbuds．rootingofplantlets，andgenetictransformation．【ResuhlTheinductionrateofadventitiousbudsderivedfromepicotyleswererangedfrom72．7％to81．6％inmediawith0．50—1．00mg／LTDZ．Comparingthreetypesofgrowthregulator

6、s．thehigherrootingrate(81．3％)wereobservedin1／2MTmediumwith1．0mg／LofABT6rootingpowder．Amongdifferentantibiotics，ti—mentinshowedbettersterilizingeffectsthancefotaximesodiumandceftriaxonesodiumonagrobacterium—mediatedtrans—formationplantletsculture．Timentinhadnoinhibitiononbudsinductionofexpl

7、ants．Duringinitialtransformationstageofbuds，5—7daysofdarknessculturewasbeneficialtoinduceKananti-buds．Among7transgenicplantlets，6plantletsshowedpositiveinPCRdetection．【Conclusion]RegenerationsystemofCitrusparadisiMacf．evDuncanecopitylswase8一tablishedandprovide