MIF在实验性大鼠重症急性胰腺炎中作用及意义.doc

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1、MIF在实验性大鼠重症急性胰腺炎中作用及意义【摘要】目的：研究MIF在大鼠重症胰腺炎中胰腺的表达情况，从而探讨MIF在重症急性胰腺炎的发病机制。方法:胰腺被膜下注射牛磺胆酸钠造成重症急性胰腺炎模型然后关腹，并于相应时间点剖杀取胰腺组织及血清，而假手术组开腹后用手术刀柄轻刮胰腺三次，然后关腹，并于6小时后剖杀取胰腺组织及血清，测定血清淀粉酶和免疫组化法进行胰腺组织MIF的测定。结果：胰腺组织MIF的表达在胰腺炎模型组比假手术组明显增高，并随着模型组时间的延长，吸光度值明显升高，各组均有统计学差异。结论：MIF在重症急性胰腺炎发生发展过程中发挥着极其

2、重要的作用。【关键词】重症急性胰腺炎；巨噬细胞移动抑制因子;免疫组化重症急性胰腺炎(Severeacutepancreatitis,SAP),它是一种全身性炎症反应性疾病，由于不同的致病因子引起胰腺腺泡的损伤，触发活性胰酶的释放、胰酶入血，导致单核巨噬细胞的激活，过度激活中性粒细胞，释放大量炎症介质，再通过炎症介质相互作用，引起“爆布样”效应，导致胰腺炎的发生。有人证实［］巨噬细胞移动移动因子(MIF),是一种重要的炎症介质，它能抑制巨噬细胞的游走，并能介导炎性细胞因子相互作用，最终导致胰腺炎的发生。但目前MIF在重症急性胰腺炎发生发展过程中的作

3、用机制尚未完全明了。本实验通过免疫组化法检测MIF在实验性大鼠重症急性胰腺炎模型胰腺组织中的表达来探讨MIF在重症急性胰腺炎在疾病发生发展过程中所起的作用。1材料和方法1.1材料健康雄SPF级wista大鼠40只，140±20g（自甘肃中医学院动物实验中心提供），免抗大鼠MIF抗体，DAB显色剂,生物素过氧化物酶（北京博奥森生物技术公司），牛磺胆酸钠（美国Sigma公司），戊巴比妥钠（青海大学医学院提供）,电子天平，离心机，恒温干燥机，全自动组织包埋机，电热恒温水浴箱，轮转切片机，显微成像系统（德国LEICA公司）。1.2方法1.2.1模型制作：

4、将wista大鼠随机分成假手术组、胰腺炎模型6h、12h和24h四组，每组10只。假手术组于禁食不禁水6小时后开腹后用手术刀柄轻刮胰腺三次，然后关腹。胰腺炎模型组于禁食不禁水6小时后开腹后予以5%牛磺胆酸钠lml/kg多点注册到胰腺背膜上然后关腹。1.2.2标本采集及观察指标：假手术组、胰腺炎模型6h组、12h组以及24h组分别于6h、6h、12h及24h进行腹主动脉采血后送青海省人民医院检验科行胰腺淀粉酶测定，放血死亡后分离胰腺并将胰腺组织分成两份放入10%中性甲醛中固定脱水24h后进行石蜡包埋并切片，常规切片后一份进行HE染色进行病理观察，一

5、份免疫组化染色制片后进行MIF表达的测定。1.3统计学处理：采用SPSS18.0统计软件，对血清淀粉酶及MIF光密度值用x±SD表示，各组间使用单因素方差分析统计。P