郑州地区男男同性恋人群HIV-1感染者基因亚型及耐药分析.pdf

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1、郑州地区男男同性恋人群HIV-1感染者基因亚型及耐药分析作者姓名：宋丹导师姓名：安玉会鲍玉洲教授学科门类：理学专业名称：生物化学与分子生物学培养院系：基础医学院完成时间：2012年5月AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterAnalysisofHIV-1subtypeanddrugresistanceamongmenwhohavesexwithmeninZhengzhouByDanSongSupervisor:Prof.YuhuiAnYuzhouBaoBiochemistryandMolecularBiologyBasi

2、cMedicalSchoolMay2012垧，郑州地区男男同性恋人群HIV-1感染者基因亚型及耐药分析硕士生研究生：宋丹指导教师：安玉会鲍玉洲郑州大学基础医学院7丄物化学与分了7上物学教研室河南郑州450001摘要背景：义滋病是当今社会公认的十大致死性疾病之一，严重威胁着人类的生命及健康。河*省是我国艾滋病的高发省，累计确认感染人数位居全国前二位。上1计纪多以有偿献血传播为主，亚型也多为B、B'。近年来，河南省艾滋病的传播途径已由输血感染向母婴传播、性传播等多途径转变，性传播比例明显增多，尤以男男同性恋者上升速度a为明显。由于男男同性恋性行为方式的特殊性，使得艾滋病通过该人群传播的可能性大大增

3、加，因此我们必须高度重视男男同性恋人群的艾滋痫感染问题。目的：了解河南哲郑州市男男同性恋人群mv-i流行株的亚型分布情况及HIV-1耐药性毒株发生和流行的情况，分析病毒传播途径、流行规律，为临床药物治疗提供依据。方法：40例男男问性恋全血样本均来自郑州市已确认为HIV-1阳性感染者，48h内进行CD4+T淋巴细胞数目测定，离心分离血浆，检测血浆中病毒载量，并从血浆中抽提RNA,运用反转录及巢式PCR方法扩增gag、pol和gp41

4、x:基因，并进行序列测定，部分样木gag区送克隆菌进行测序，使用Chromas软件进行序列质量评价，Contig软件进行序列拼接，应用BioEdit软件对序列进行校

5、对编辑，利用MEGA3.1软件构件系统进化树，同时使用美国LosAlamos国家实验室HIV核酸序列库和美国NCBI提供的在线分析工具进行比对分析，根据二区分型结果最终确定基因亚型。将测序得到的pol区序列提交至斯坦福大学HIV-1耐药数据库进行耐药分析。结果：1^1.通过分析男男同性恋中未接受治疗mn滋m感染的cd4—丁淋巴细胞数目和病毒级量的关系，我们发现二VI冇&相关关系。2.亚型分析结果：经测序，最终得到24条gag区全长基因序列、22条pol区全长基因序列和18条gp41区序列，根据二个结构基因的分型结果，得出郑州市男男同性恋人群艾滋病感染者存在四种亚型，分别为B、CRF01

6、-AE.CRF07-BC,01B亚型。3.耐药情况：男男同性恋屮未接受治疗的艾滋病感染者未发现耐药突变；接受治疗的艾滋病感染者出现对蛋白酶抑制剂奈非那韦低度耐药，对非核苷类逆转录酶抑制剂依非书仑、奈书拉平高度耐药，未检测到对核fF类逆转录酶抑制剂耐药相关突变。结论：1.郑州市男男同性恋中未接受治疗的艾滋病感染者的CD4+T淋巴细胞数目和病毒载量呈负相关关系。2.小样本量的流行病学调杳显示，河南省郑州市男男同性恋人群中主要存在B、CRFOl-AE、CRF07-BC和01B四种亚型，重组型毒株逐渐占优势。3.郑州市男男同性恋中，未接受治疗的艾滋病感染者对蛋白酶抑制剂和逆转录酶抑制剂均未产生

7、耐药。4.郑州市男男同性恋接受治疗的感染者中，两个艾滋病感染者对蛋白酶抑制剂奈非那韦低度耐药；一个患者对非核苷类逆转录酶抑制剂依非韦仑、奈韦拉平高度耐药。关键词：艾滋病男男问性恋基内亚型耐药性突变IIAbstractAnalysisofHIV-1subtypeanddrugresistanceamongmenwhohavesexwithmeninZhengzhouPostgraduate:SongDanTutor:AnYuhuiBaoYuzhouDepartmentofBiochemistryandMolecularBiologyBasicMedicalSchoolofZhengzhouUn

8、iversityZhengzhou,450001AbstractBackground:AIDS(acquiredimmunodeficiencysyndrome)isoneoftenfataldiseasesintheworld,whichseriouslythreatenthepeople'slifeandhealth.Therearemorepeopleinfectedhumanimmunod