梅毒血清学检测策略.pdf

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1、梅毒血清学检测策略广东省皮肤性病防治中心广东省皮肤病医院郑和平内容一、梅毒血清试验一，梅毒血清学试验：1.非梅毒螺旋体抗原血清学试验：1）非梅毒螺旋体血清学试验2）梅毒螺旋体血清学试验•原理：梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放以及其螺旋体细胞表面释放的类脂物质，刺激机体产生抗类脂抗体（反应素）。在体外该抗体与心磷脂、卵磷脂和胆固醇组成的抗原反应，形成凝集二，梅毒筛查策略反应。•方法：VDRL(venerealdiseaseresearchlaboratorytest)USR(unheatedserumreagintest)RPR(rapidplasmareagincir

2、clecardtest)TRUST(tolulizedredunheatedserumtest)特点：非特异性反应，2、梅毒螺旋体抗原血清试验非特异性抗体•原理：基于TP特异性抗原，检测TP抗体产生于感染后5-7W•方法：治疗后消失（血清治愈）1.凝集法：TPHA，TPPA治疗后保持低滴度（30%血清固定）2.FTA－ABS3.ELISA与活动度有关，疗效判断4.化学发光与IgM作为复发和具有传染性指标5.TP-RT（胶体金法）6.19sIgM生物学假阳性率较高•TP血清学试验不能鉴别梅毒螺旋体与其它非病螺旋体，如(yaws:T.pallidumsu

3、bsppertenue;bejel-endemicsyphilis:T.pallidumsubspendemicumandpinta:T.carateum).1）TPPA/TPHA•原理：•超声裂解TP抗原，致敏明胶颗粒/家禽RBC，与血清中抗TP抗体结合，发生凝集反应。TPPA•临床：梅毒确证•注意•存在交叉（1：80）•低滴定时候，FTA-ABS确证TPPATPPA2）FTA-ABS(fluoresenttreponemalantibodyabsorptiontest)阴性•原理：血清经吸收剂（Reiter)去非特异性抗体，与TP反应，形成Ab+Ag复合物；

4、再加TITC标记的抗人IgG/IgM抗体，形成荧光复合物，荧光镜下，TP呈苹果绿色荧光。弱阳性•临床：最可靠确证试验•特点：高度特异，阳性3）ELISA：•原理：TP特异性抗原包备酶标板，与血清中TP抗体结合，加入酶标抗体，底物显色。（见图）•临床：用于梅毒筛查•注意：图18-1TP抗体酶联免疫法试验图18-2TP抗体酶联免疫法试验双抗原夹心一步法原理双抗原夹心二步法原理高敏感性，特异较？4）化学发光法•化学发光酶免疫分析•化学发光酶免疫分析(chemiluminescenctenzymeimmunoassay，CLEIA)•原理•微粒子化学发光免疫分析（mic

5、roparticlechemicluminescenceimmunoassay，MCIA）•电化学发光免疫分析(electrochemicluminescenceimmunoassay，ECLIA)•微粒子化学发光免疫分析•电化学发光(ECLIA)免疫检测原理亲和素5）TP-RT胶体金法：•原理（见图）•临床：筛查•注意：敏感性？•临床：用于梅毒筛查特异较？•注意：高敏感性，特异较？中国CDC评估结果4)19sIgM-WB•原理：WB•临床：早期梅毒•先天梅毒抗体变化规律特异性抗体特异性IgM抗体IgM2W特异性IgG抗体IgG4W抗5-7周反应素特异性总抗

6、体治疗后Ig滴度可下降，但可能终身存体浓4周IgG非特异性抗体在度IgM是体内有活的螺旋体存在刺激机2周IgM体产生，是有传染性和可能复发的指针窗口期I期II期III期治疗后隐性梅毒（早、晚）二、梅毒血清学检测策略Thetraditionalalgorithm1.美国CDC推荐策略：•敏感性低、特异性低•2006年美国CDC梅毒筛查策略示意图有漏检，阳性需要特异性抗体试验确证。•与疾病的活动性高度相关•监控患者对治疗的反应•适合于小样本量的实验室•便宜Thetraditionalalgorithm•CDC.Syphilistestingalgorithmsu

7、singtreponemaltestsforinitialscreening--fourlaboratories，NewYorkCity，2005-2006.MMWR.Morbidityandmortalityweeklyreport，2008，57(32):872.ComparisonofthreesyphilisserodiagnosisalgorithmsandclinicaldiagnosisEIA/CIARPRLab1+→-→Lab2+→-→TPPA/FTA-ABSLab3+→+/-→Lab4+→+/-No665RPR-/TPPA+patientswe

8、reexcludedfr