梅毒血清学检测的操作规范

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1、梅毒血清学检测的操作规范主要内容梅毒概述梅毒血清学检测方法梅毒检测技术规范梅毒是一种几乎可以侵犯全身所有器官，而产生多种症状和体征的慢性传染性疾病。十六世纪初由欧洲传入亚洲，后蔓延我国。梅毒又称为杨梅疮、广东疮、疳疮、下疳、霉疮等。梅毒概述梅毒螺旋体生物学特征病原体为苍白密螺旋体苍白亚种,不易着色直径0.10~0.15μm，有8~14个致密而规则的小螺旋，两端尖直，运动活跃，运动方式多样抵抗力极弱，对温度和干燥特别敏感对青抗生素敏感梅毒传播途径—性传播性接触是主要传染途径未经治疗的患者在感染后1年内具有传染性随着病期的延长，传染

2、性越来越小感染后2年，通过性接触一般无传染性梅毒传播途径—母婴传播妊娠7周时，梅毒螺旋体即可通过胎盘传播未经治疗者，虽已无性传播（病期>2年），但妊娠时仍可传染胎儿，病期越长，传染性越小梅毒传播途径—其他途径输血传播接触传播接触部位附有梅毒螺旋体日常用品、接吻、哺乳、医疗器械等途径梅毒的分期一期梅毒硬下疳和/或腹股沟淋巴结肿大二期梅毒病期在2年内有多形性皮疹等三期梅毒病期在2年以上，可有皮肤黏膜损害等隐性（潜伏）梅毒胎传（先天）梅毒梅毒的诊断病史症状实验室检查梅毒的实验室检查对诊断有重要意义梅毒实验室检测技术病原学检测血清学检测

3、梅毒实验室检测的特点临床表现取材部位检查方法一期梅毒溃疡淋巴结病原学检查血液血清学检查二期梅毒皮损淋巴结病原学检查血液血清学检查潜伏梅毒血液血清学检查三期梅毒血液血清学检查神经梅毒血液血清学检查脑脊液细胞、蛋白量检查VDRL等梅毒的病原学检测--显微镜检测法暗视野显微镜检查镀银染色检查暗视野显微镜检查标本类型：梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液、淋巴结穿刺液镀银染色检查基本原理：梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染色，从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体结果：棕褐色的梅毒螺旋体非梅毒螺旋体抗原血清学检测（非特异性梅毒抗体）梅毒螺

4、旋体抗原血清学检测（特异性梅毒抗体）梅毒血清学检测分类非梅毒螺旋体抗原血清学检测原理人感染梅毒螺旋体后，组织受到破坏释放一种类脂成分，与梅毒螺旋体结合形成完全抗原，刺激机体在3~4周时产生类脂质抗体（反应素）。抗体的作用治疗监测和疗效监测无保护作用VDRL(性病研究实验室试验)USR（不加热血清反应素试验）RPR(加速血浆反应素环状卡片试验)TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)非梅毒螺旋体抗原血清学检测方法抗原基本成分为心磷脂、卵磷脂和胆固醇抗原抗体集合形成复合物，凝集成网状肉眼可见的沉淀颗粒试验方法敏感性和特异性基本相似操作简

5、单，价格便宜可定量检测非梅毒螺旋体抗原血清学试验VDRLUSRRPRTRUST抗原成分心磷脂、卵磷脂、胆固醇同前+EDTA+氯化胆碱同前+EDTA+氯化胆碱+活性炭同前+EDTA+氯化胆碱+甲苯胺红抗原稳定性不稳定,1天稳定4℃～8℃保存12个月稳定4℃～8℃保存12个月稳定4℃～8℃保存12个月血清试验前处理需灭活不需灭活不需灭活不需灭活反应板及结果判断玻片，肉眼或显微镜玻片，肉眼或显微镜纸卡片，肉眼纸卡片，肉眼注释唯一用于检查脑脊液的试验，诊断神经梅毒结果容易判断结果容易判断四种非特异性试验方法比较非梅毒螺旋体抗原血清试验R

6、PR/TRUST基本原理：在心磷脂、卵磷脂和胆固醇等组成的抗原中加入活性炭/甲苯胺红，与待检血清中的反应素结合，形成肉眼可见的红色絮状物。试验所需仪器测速要求：100±2转/分钟试验操作—定性检测(1)加样：吸取50μL血清/浆放在卡片圈中，并均匀地涂布在整个圈中(2)加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头加1滴抗原（16.7ul）(3)反应：将卡片置水平旋转仪旋转8分钟，立即在亮光下观察结果结果判读RPRTRUSTTRUST凝集反应强度分级++++：抗原颗粒呈粗大团块，凝结+++：抗原颗粒中等团块、凝结++：颗粒凝结，与清亮液体呈

7、明显反差+：抗原颗粒凝结、均匀肉眼可见±：抗原颗粒细小凝结，肉眼可辨―：圆圈内仅见红色集中于中央一点或均匀分散。试验操作—定量检测（1）稀释液准备：在圈内加入50μL生理盐水（根据需要确定稀释度），勿将盐水涂开。（2）加样：吸取50μL血清与各圈中生理盐水做系列稀释，并涂布整个圈内。（3）余同定性试验中。孔号12345678稀释倍数原倍1:21:41:81:161:32阳性K阴性K生理盐水(ul)-50.050.050.050.050.0--样品(ul)50.050.050.050.050.050.0弃50.0--阳性血清(ul

8、)------50.0-阴性血清(ul)-------50.0抗原悬液(ul)16.716.716.716.716.716.716.716.7定量检测操作步骤非梅毒螺旋体抗原检测意义早期梅毒硬下疳出现1~2周后，血清学可呈阳性梅毒患者经治疗后血清滴度可下降并转阴