文昌鱼(Branchiostoma belcheri) CFH基因的克隆、原核表达与免疫功能分析.pdf

《文昌鱼(Branchiostoma belcheri) CFH基因的克隆、原核表达与免疫功能分析.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、话ｗ＇＇＇、．．心．单．＼／：．；—＿索取号７８／１４．１１０當级公：Ｑ巧！／＆京巧苑乂矿硕：ｔ学化论文且１＾１＾舍厘麵１ＬＪｉ－？－－．，．．一＇．‘－、－－Ｌ，；／－’－．＇．＇？．．．－：－＇．—‘＂－、．■＇．＿．Ｖ＼、；；＿女Ｍ鱼Ｌ（ＪＢｒａｎｃｈｉｏ別ｏｍａｂｅｌｃｈｅｒｆ）ＣＦ打基因的克隆、原核表达与免疫功能分祈？？．＇＇Ｖ＇＇．．．ｙ…－研究巧生：蔡－茲Ｉ■＂■ｒ，「广１＇

2、？叫ｔ機讚教师专、Ａ心产马飞教按：，＇＇：護命科挙挙院＇培养单接边－為学翁＾生物学．．■■？？，八＾二级学科扣遗传学完成时间；２０巧年４灯２０曰答辩眯间：２０巧年岩丹化日ＶＨ．．＂－＾■．三＇、、？．．－．．■；－．学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果。本论文中除引文外，所有实验、数据和有关材料均是真实的。本论文中除引文和致谢的内容外，不包含其他人或其它机构已经发表

3、或撰写过的研究成果。其他同志对本研究所做的贡献均己在论文中作了声明并表示了谢意。公２０日学位论文作者签名；ｉ日期：２０绅＾学位论文使用授权声明研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属南京师范大学。学校有权保存本学位论文的电子和纸质文档，可ＬＪＸ借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容，可Ｗ采用影印、复印等手段保存、汇编本学位论文。学校可レッ向国家有关机关或机构送交论文的电子和纸质文档，允许论文被查阅和借阅。（保密论文在解密后遵守此规定）：：，保保密论文注释本学位论文属于保密论文密级密期限为

4、。年学位论文作者签名：指导教师签名：日期：从許巧公日日期：如反年ｆ摘要补体系统（Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔｓｙｓｔｅｍ）是先天免疫的重要组成部分，通过经典途径ｃａｓｓｃａａｔｈｗａ、ｅｃｔｉｎａｔｈｗａｅｍａｔｖｅａｔｈｗａｓｌｉｌｐｙ凝集素途径＂ｐｙ和替代途径灿ｔｉｐｙ（）））激活补体，进而引起炎症反应，发挥溶菌作用，溶解免疫复合物，杀伤细胞和调一节免疫反应等重要作用。补体因子ＨＣｏｍｌｅｍｅｎｔｆａｃｔｏｒＨＣＦＨ是替代途径中（ｐ，）种重要的调节因子，最初被认为是包含２０个保守

5、的补体蛋白结构域（ｃｏｎｓｅｒｖｅｄｃｏｍＣＣＰ一ｌｅｍｅｎｔｒｏｔｅｉｎｄｏｍａｉｎｓ，致ｐｐ’）的糖蛋白。每个补体蛋白结构域也称作重复短序列（ｓｈｏｒｔｃｏｎｓｅｎｓｕｓｒｅｐｅａｔｓ，ＳＣＲｓ），都包含大概６０个氨基酸，其中包括一一些相对保守的甘氨酸、脯四个保守的半脫氨酸残基，个髙度保守的色氨酸和氨酸和疏水性残基。ＣＦＨ蛋白可通过结合Ｃ化来抑制Ｃ３转化酶的生成，同时ＩＣ３ｂ也可Ｗ作为补体因子的辅因子加快的降解，进而使其失活。文昌鱼是脊索动物的祖先，是研究无脊椎动物过渡到脊椎动物的模式动物。形态学和

6、分子生物学研巧表明，文昌鱼对阐明脊椎动物进化Ｗ及免疫系统起源起着重要作用。近年来，大量不同物种的基因组测序完成，特别是佛罗里达文昌鱼＊》佩０？姗０如？》１０典７油７６）全基因姐测序的完成，｜＾及比较免疫学的高速发展，使一得人们越来越关注文昌鱼免疫方面的研巧，进步了解脊椎动物进化化及免疫系统起源方面的问题。因此，本论文克隆得到了白氏文昌鱼ＣＦ片基因，并对其序列进行了生物信息学分析；同时检测了文昌鱼基因在不同组织中的表达情况：并对白氏文昌鱼ＣＦ好基因的抗菌免疫进行了初步研究。论文研究结果如下：（１）克隆得到了白氏文昌

7、鱼Ｃｆ好基因的全怜命名为巧／。其ｃＤＮＡ’’序列全长为１２９５ｂ其中５ＵＴＲ为１８１ｂ，３ＵＴＲ为２５９ｂ，ＯＲＦ长为ｐ，ｐｐ８５５ｂｐ。（２）生物信息学分析表明；白氏文昌鱼ＣＦＨ蛋白（ＡｍｐｈｉＣ閒）由２８４个氨一基酸组成，包含两个保守的补体蛋白结构域（ＣＣＰ）和个含２４个氨基－酸的信号狀，但没有发现Ｎ糖基化位点３１．１２ＫＤａ，理。其预测分子量为论等电点为４．２９。（３）白氏文昌鱼Ｃ巧／基因的进化地位位于无脊椎动物与脊椎动物之间，与经一典分类法是致的。一（４）通过原核表达实验，在大肠杆菌中表达出了条

8、特异蛋白条带，并且其分子量大小与预计的白民文昌鱼ＣＦＨ蛋白理论分子量大小相符。Ｉ（５）解剖白氏文昌鱼成体、、、，，分离出肌肉脊索肝盲塞鲍和厮五个组织检测发