恭城月柿单宁提取纯化工艺优化及抗氧化活性初步研究.pdf

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4、活性初步研究摘要恭城月柿主要产于广西恭城县,因为其果肉颜色明亮、口感脆嫩、味道鲜甜,被誉为“中华名果”。每年恭城月柿在种植过程中会产生15%~20%落果和疏果,这部分未成熟的月柿单宁含量丰富,含糖量少,可利用程度低。研究发现,单宁具有抗氧化、抗过敏、抑制肿瘤生长、提高免疫力等效用。目前,单宁的研究依然存在纯化困难,达不到食品、药品安全质量的标准的问题。改进月柿单宁的提取、纯化工艺,可以避免资源的浪费。因此,本课题以涩柿(恭城月柿)为原料,对单宁的提取、分离工艺进行优化,确定最佳的工艺条件。并且对恭城月柿的单宁的抗氧化活

5、性进行探究,为月柿单宁的产品的高值化开发提供理论基础。本研究采用超声波辅助提取的方法对月柿单宁的提取工艺进行优化。通过单因素和响应面试验得到的最佳工艺条件为:乙醇浓度为40%、提取温度为55℃、料液比为1:15、超声功率为300W、提取时间为1h。在此条件下,月柿水解单宁的提取量为23.64mg/g,缩合单宁的提取量为30.42mg/g。它们的提取率分别为80.61%和83.58%。本研究通过大孔树脂吸附法纯化月柿的水解单宁。首先利用大孔树脂XAD16对恭城月柿的水解单宁进行初步的纯化。通过树脂的静态吸附和解析试验,确

6、定上样液的浓度为0.5mg/mL,洗脱剂(乙醇)的浓度为75%。在静态试验的研究基础上进行动态试验,确定最合适的吸附条件为:流速1mL/min,径高比为1:15,样液浓度为0.5mg/mL,上样量为620mL。此时XAD16树脂的吸附量为165mg。采用75%乙醇洗脱,解析出来的水解单宁的含量为112mg,洗脱率为67.8%。为了进一步提高成品水解单宁的纯度,利用大孔树脂XAD1600对XAD16洗脱液进行进一步的纯化。XAD1600树脂的吸附的条件为:流速1mL/min,径高比为1:15,样液浓度为0.5mg/mL,

7、上样量为550mL。此时XAD1600树脂的吸附量为158mg。采用75%乙醇洗脱,解析出来的水解单宁的含量为127mg,洗脱率为80.3%。通过两次的大孔树脂的分离纯化得到的成品中水解单宁的纯度为88.4%,相较于月柿的醇提物,水解单宁的纯度提高了5.59倍。用不同浓度的乙醇对月柿水解单宁进行梯度洗脱,得到水解单宁含量较高的组分YD1、YD2、YD3、YD4,它们分别占洗脱出来的总水解单宁的16.14%、29.81%、17.39%、37.26%。纯度分别为79.9%、85.4%、89.8%、87.1%。I-本研究还对

8、各组分恭城月柿水解单宁清除OH﹒、O2·和DPPH﹒的效用进行了探究。研究发现,在设定的浓度范围内,各组分中的水解单宁对于OH﹒清除率呈现剂量关系。在0.6~1.0mg/mL范围内,YD3清除OH﹒的效果高于没食子酸。在1.0mg/mL时的清除率为32.82%。在0.05~0.20mg/mL的范围内,YD3-清除O2·的效果高于Y

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