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1、鹿仙草活性成分提取纯化及抗氧化护肝活性研究筒鞘蛇菰（BalanophorainvolucrataHook.f.）为蛇菰科蛇菰属植物，别名鹿仙草[1]，蛇菰为寄生性草本植物，一年或多年生，无叶绿素和气孔，叶退化呈鳞片状或不存在，无正常根，靠根茎上的吸盘寄生于寄主植物的根上，根茎粗，通常分枝，表面常有瘤或星芒状皮孔，顶端具开裂的裂鞘。其全草入药,寄主分布于海拔500-2600m的多种林木,植株大多在中秋前后露出地面,生长季节性强,生长期短,故资源稀少。《本草纲目》将蛇菰以葛菜花之名列入菜部第28卷,别名葛乳。蛇菰资源分布：分布于福建
2、、湖北、广东、广西、四川、云南等地。具有壮阳补肾，理气健脾，止血生肌，清热解毒的功效。民间常用于治疗阳痿，慢性肝炎，消化道出血，月经过多，遗精，肿瘤等症。蛇菰的品种来源较多,采用不同的提取方法和检测手段,得到的化学成分不尽相同。蛇菰属植物中所含化学成分有很大一部分是三萜类。另外甾醇类、多酚类[2]含量也较多，酚类有许多药理作用。1919年Simon[3]等人从蛇菰中分离出蛇菰素；到1998年，刘锡葵[4]等人正式提出蛇菰素分为蛇菰素A(balanophorinA)和蛇菰素B(balanophorinB)。含量较多的活性成分还有：
3、苯丙素类化学成分，多数以酚类及其衍生物为主，如反式松柏苷。环烯醚萜和黄酮类：环烯醚萜苷、二氢查耳酮。鞣质：鞣质也是蛇菰属植物中的一类主要成分。到目前为止，人们共分离出34种鞣质类化合物。其他成分：从蛇孤属植物中分离出来的化合物还有硬脂酸，多糖等。鹿仙草有效成分的提取方法有水提法、有机溶剂提取和超声提取。水提法是中草药传统提取方法。适用于有效成分能溶于水、对湿和热较稳定的药材。戴忠[5]从鹿仙草的水溶性成分中分离出7种极性较强的化合物，分别为鞣花酸，香豆酸，咖啡酸，没食子酸，槲皮素，棉花苷，胡萝卜苷。鹿仙草中含有脂溶性成分，沈小玲
4、[6]用工业酒精浸提鹿仙草中的有效成分，浸提3次，每次24h，合并浸提液，浓缩得粗品，然后用甲醇溶解，再经反复硅胶柱层析得到4种化合物：松柏甙、甲基松柏甙、β-谷甾醇、乙酸羽扇豆醇酯。鹿仙草的超声提取是由于超声波振动的空化、机械粉碎、搅拌以及热力学作用,空化泡周围的微流也对提取原料产生切向力以加速溶剂向细胞中的渗透；超声还可使植物药材细胞被击破,有利于溶剂浸入细胞中,加速原料中的有效成分进入溶剂,因此提高了有效成分的提出率。戴忠[7]提取蛇菰中的化学成分时，取2克样品，加入30%的甲醇40ml，超声30min，可使提取基本完成。
5、使用不同的溶剂所提取的成分也不尽相同，可根据实验需要，采取适当的溶剂。鹿仙草的纯化方法主要有柱层析法。柱层析是以液体为流动相，利用溶质分子在流动相和固定相间的吸附和解析能力不同而实现分离的。高秀丽[8]以95%乙醇热回流提取3次，浓缩得到浸膏，上硅胶柱,用氯仿-甲醇系统梯度洗脱得到反式咖啡酸、反式香豆酸、氢醌。王彦改[9]用95%乙醇回流提取得粗液，然后用乙酸乙酯进行萃取，用SephadexLH-20(甲醇-水)、硅胶制备薄层(甲苯-甲酸乙酯-甲酸)和ToyopearlHW-40C(乙醇-水)进行反复色谱分离,得到8种纯度较高的
6、化合物。蛇菰中含有三萜类、苯丙素类、甾醇类、鞣质类、黄酮类及其苷类等多种化学成分，其中三萜类、苯丙素类及黄酮类均具有抗氧化活性[10]。多酚类成分是蛇菰属植物中所含的一大类成分，是止血、抗炎、抗氧化以及抗肿瘤的主要有效成分。黄酮类多含有多羟基，是抗氧化、抗病毒以及抗肿瘤的主要有效成分。蛇菰属植物作为药用具有许多活性，除用于治疗肺热咳嗽、吐血、肠风下血、腰痛、痔疮外，还有一部分品种用于治疗肝炎、肿瘤，效果良好。在护肝方面，C.NLin等[11]对包括蛇菰素A和B在内的抗肝损伤药物进行的研究中已经证明了蛇菰素具有较强的保肝活性。戎聚
7、全等[12]采用毒理和生化方法检测蛇菰的安全性及其解酒毒后小白鼠的死亡率和血中乙醇浓度的变化,观察蛇菰对修复酒精性肝损害的病理变化。研究发现蛇菰具有解酒毒作用。汤子春[13]进一步研究了鹿仙草护肝的作用机理，酒精在人体内经ADH和ALDH两种酶的作用，转化为CO2和水，鹿仙草的提取物可以提高ADH和ALDH的活性,可以加快乙醇在体内的代谢速度;还可以增强SOD和GSH-Px的活性,以清除酒精在人体内产生的自由基,保护细胞膜的结构和功能,减轻肝组织的损伤。以鹿仙草的乙酸乙酯提取物为原料制成一种醒酒剂[14]具有良好的解除急性酒精中
8、毒及降低血液中的乙醇含量。在抗肿瘤方面，白树勋[15]等人对疏花蛇菰B.氯仿提取物的抗小鼠实体型肝肿瘤H22活性的研究表明，其具有良好的抗肿瘤活性。戴忠[7]也证明了蛇菰的乙酸乙酯提取物对小鼠实体型肝肿瘤H22有较强的抑制作用。经化学分离结果可知，乙酸乙酯的提取
