文蛤多糖的提取纯化、结构分析及抗氧化、免疫活性初步研究

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时间:2019-03-14

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1、分类号密级硕±学位论文题目;文始多糖的提取纯化、结构分析及抗氧化、免疫活忡初步研究英文并歹。题目:Extraction,puri打cation,structuralanalysisandantioxidant,immunityactivitiesreliminarstudyofpypolysaccharidesfromMeretrixmeretrixLinnaeus研究生:奎述专业;药学研究方向:微生物与生化药学导师:陆震鸣副教授指导小组成员:

2、史劲松教授李恒副教授学位授予日期:答辩委员会主席:?槪子江亩大学地址:无锡市蠢湖大道1800号二〇—五年十二月I独倒性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究王作及取得的研究成果了文中特别加>乂标注和致谢的地方外,论文?尽我所知,除中不色含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含本人为获得江南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一同工作的同志.与我对树究所做的献均芭在论文中作了明确的说明并表示谢素。签克:嫂日期:足^文〇[浑U3Bj关于论

3、文使用搜权的说明本学位论文作者完全了解江南大学有关保留、使用学位论文的规定:江南大学有权保留并向国家有关部n或机拘送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查巧和猜巧》^^将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库,可进行检索,可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文,人电一致并互本子文档的内容和纸质论文的内容相.保密的学位论文在解密后也遵守此规定。签名:寺睾导师签义:叩4衫為、日期:W玉坪1么巧X巧摘要摘要’e化从/xme/它的JCLinnaeus.)主,资源丰富文贻(M产于

4、我罔东部沿海,具有较島的替养价值和药用价值一。自古W来文始即为药食同源的动物之,传统医学证明文始浸提物,文贻所含有的蛋白具有治疗发炎、湿热、疮、保肝和防癌的功效。近代研究表明、多一糖、脂肪酸等是其生理、药理活性的物质基础。多糖类物质是文贻中的类主要活性物,、提高免疫及抗肿瘤等方面均具有良好的生物活性,质其在抗氧化。尽管如此目前对于文始多糖的研究仍不够系统和深入,关于文始《糖的结构W及活性等方面的信息仍然一匿乏,。为了进步了解文始中多糖成分的理化性质和生物活性本课题对文始多糖进行了提取,、分离和结构分析并初步开

5、展了抗氧化及免疫调节活性研究。本课题依次采用酶法提取、艺醇沉淀、Sevage法除蛋白、石醇再沉淀的方法提取获6-得了文始多糖.01.0%。,提取得率文始干重计)为0W文始多糖得率为指标,选取加酶量、加酶种类、提取时间和料水比四个冈素进行多糖提取的单冈素条件优化。优化后的提取工艺为:膜蛋白酶用量2.0%(W底物计),料水比1:10,提取时间4h。采一5-evae.0%的文始粗多糖DEAE的纤维素层用Sg法脱蛋白得到蛋白含量小于,进步用析柱和Superdex-200凝胶层析柱进行分离纯化后得到两个多糖组分MMPX

6、-1和-2MMPX。erdex200MPX-PX-经S叩凝胶色谱括法对M1和MM2进行纯度鉴定,证明二者都一一NMR是均的多糖组分。进步采用紫外光谱UV)、红外光谱IR)、核磁共振、气相((()色谱(GC)和高视酸氧化、Sim化降解、甲基化反应等方法对上述两个文始多糖组分进行6MMPX-11.X结构表征及鉴定:0410Da,其单糖组成。分析结果表明的平均分子量为,相应的摩尔百分比为21.1%,29%,49.0%包括甘露糖、葡萄糖和半乳糖.9主链为;--^---半乳糖,。一43葡萄糖,14甘露糖,支链为连接

7、在主链半乳糖糖基C6)|()p5一3-a-MMPX-25X位置上的"葡萄糖和a构型末端葡萄糖。的平均分子量为.010Da,)一--;.1主耍由葡萄糖和半到糖组成,其摩尔百分比分别为877%和2.3%,主链为。4〇1葡)--^3--萄糖,支链为连接在主链葡萄糖C6位置上的3半乳糖和构型末端半乳糖。。)(P一步对纯化得到的两个多糖组分进行体外抗氧化义细胞免疫活性的评价进。W抗坏--血酸为阳性对照,对文始多糖MMPX1和MMPX2进行体外清除DPPH自由基、超氧阴离子自由基、径基自由基的能力yX及总还原能力的表征等

8、实验。实验结果表明,两个一MMPX-2-多糖组分均具有定的抗氧化活性,的抗氧化活性略高于MMPX1。yj旨多糖--LPS为阳性对照,1和MMPX2诱导小鼠单核巨隨细胞RAW2647对文始多糖MM

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