铜藻多糖的纯化、结构及免疫活性的研究

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1、分类号：_06UDC；540学号：12112822276密级：公开瀛州太嗲硕士学位论文铜藻多糖的纯化、结构及免疫活性的研究作者姓名：__________李伟_________学科、专业：化学生物学研究方向：活性大分子化学生物学指导教师：吴明江（教授）完成日期：________2015年5月温州大学学位委员会温州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所早.交的学位论文是我个人在导师指导K进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除r文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得温州大学或其它教育机构的学位或证书而使用过

2、的材料。与我-•冋工作的n志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作/明确的说明并表示了谢意。温州大学学位论文使用授权声明本人完全了解温州大学关于•收集、保存、使用学位论文的规定，s卩：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被杳阅和借阅。本人授权温州大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本人在-师指导F完成的论文成果，知识产权归属温州大学。保密论文在解密后遵守此规定。日期：6月7门分类号：O6UDC：540学号：12112822276密级：公开温州大学硕士学

3、位论文铜藻多糖的纯化、结构及免疫活性的研究作者姓名：李伟学科、专业：化学生物学研究方向：活性大分子化学生物学指导教师：吴明江（教授）完成日期：2015年5月温州大学学位委员会铜藻多糖的纯化、结构及免疫活性的研究摘要铜藻（Sargassumhorneri）是丰富的可食用海藻资源之一，富含营养物质，尤其是具有多种生物活性的多糖。本文采用水提醇沉法提取铜藻多糖，并主要采用柱层析法对粗多糖分级纯化，利用化学和仪器分析手段推断纯级分结构特征。通过小鼠体内和体外实验研究铜藻多糖的免疫活性。采用冷水浸提、70℃热水和Na2CO3溶液分别煮提，再用乙醇沉淀得到五种铜藻粗多糖：

4、冷水提取褐藻淀粉（CSHL）和褐藻糖胶（CSHP）、热水提取褐藻淀粉（HSHL）和褐藻糖胶（HSHP）及褐藻胶（SHA）。结合使用阴离子交换和分子筛凝胶柱层析纯化褐藻糖胶和褐藻淀粉组分，碱溶酸沉的方法纯化褐藻胶组分，共得到以CSHP22和HSHP11为主级分的16种铜藻多糖组分。进一步的分析表明：糖含量最高达87.86%（HSHP11）；SHA的糖醛酸含量最高，达29.70%；除SHA外，蛋白质最高含量仅为4.27%（HSHP13）；硫酸根含量最高达26.60%（CSHP21）。分子量分布范围在354.6×10Da(HSHP13)～6.8×10Da(CSHP)

5、，单糖组成分析表明其主要由岩藻糖构成。利用高碘酸氧化、Smith降解、甲基化等化学方法和IR、GC-MS及NMR等仪器分析方法解析褐藻糖胶主级分CSHP22的结构特征，结果表明CSHP22是一种具有分支、结构复杂的多糖，其主链主要由1,3-Fuc构I成，主链中穿插着少量的1,6-Gal。1,3-Fuc的C-2和C-4可能是分支点或硫酸根取代的位置。核磁共振分析确定CSHP22中存在--→2)-α-L-Fucp4SO3-(1→和→3)-α-L-Fucp4SO3-(1→两种片段。以ICR小鼠为模式动物，研究CSHP、CSHP22、HSHP及HSHP11体外给药对小

6、鼠免疫细胞的影响，及体内给予CSHP对小鼠免疫活性的影响。体外和体内实验均表明铜藻多糖既能显著增强NK细胞杀伤活性、促进腹腔巨噬细胞的吞噬能力和细胞毒性，也能显著促进小鼠脾脏T、B淋巴细胞的增殖能力，证实铜藻中的褐藻糖胶具有调节免疫的活性，并且在体外实验中不同的多糖级分具有不同的免疫活性。关键词：铜藻，多糖，纯化，结构，免疫活性IITHEPURIFICATION,STRUCTUREANDIMMUNOLOGICALACTIVITYOFPOLYSACCHARIDESFROMSARGASSUMHORNERIABSTRACTSargassumhorneriisoneo

7、ftheabundantedibleseaweedresources,whichcontainsrichnutritivematerials,especiallythepolysaccharideswithavarietyofbiologicalactivities.Inthepresentresearch,thepolysaccharideswereisolatedfromSargassumhorneribywaterextractionandalcoholprecipitation,andthenprimarilyfractionatedbycolumnc

8、hromatographies.Che