猴头菇抗氧化活性成分的分离纯化及结构鉴定研究

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1、硕士学位论文猴头菇抗氧化活性成分的分离纯化及结构鉴定研究作者姓名黄越学科专业食品科学与工程指导教师黄惠华教授所在学院食品科学与工程学院论文提交日期2018年4月19日StudyontheIsolation,PurificationandStructureIdentificationofAntioxidantConstituentsinHericiumerinaceusADissertationSubmittedfortheDegreeofMasterCandidate：HuangYueSupervisor：Prof.HuangHuihuaSouthCh

2、inaUniversityofTechnologyGuangzhou,China分类号：TS201.1学校代号：10561学号：201520120524华南理工大学硕士学位论文猴头菇抗氧化活性成分的分离纯化及结构鉴定研究（罐组式“动态逆流集成超声波”技术研究及猴头菇多糖提取示范、2013B090600008；猴头菇多糖提取物对动物胃黏膜细胞的保护及抗过敏、调节机体免疫等功能活性的研究）作者姓名：黄越指导教师姓名、职称：黄惠华教授申请学位级别：工学硕士学科专业名称：食品科学与工程研究方向：食品科学论文提交日期：2018年4月19日论文答辩日期：2018年

3、6月3日学位授予单位：华南理工大学学位授予日期：年月日答辩委员会成员：主席：欧仕益教授委员：李斌教授；赵强忠教授；唐传核教授；黄惠华教授摘要猴头菇属担子菌纲、多孔菌目、齿菌科、猴头属，关于其抗氧化研究大多集中在猴头菇多糖上。本课题以猴头菇子实体为原料，优化乙醇提取抗氧化活性成分工艺，对所得醇提物的不同极性萃取相进行抗氧化活性成分筛选，选择乙酸乙酯萃取相经硅胶柱层析和半制备液相色谱法进行进一步分离纯化，将纯化得到的单体化合物进行结构表征与鉴定。研究所得结论如下：（1）通过单因素和正交实验得到乙醇提取猴头菇抗氧化活性成分的最佳提取工艺：乙醇浓度50%，料液

4、比1:15g/mL，提取温度50°C，提取时间5h，提取次数2次。按最优提取工艺得到的猴头菇醇提物具有较好的ABTS+·清除率以及良好的DPPH·、·OH清除率和还原能力，对DPPH·、ABTS+·的清除率分别可达到56.85%（5mg/mL）、79.85%（0.5mg/mL）。（2）将猴头菇醇提物采用不同极性有机溶剂萃取后得到石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相和剩余水相，其得率分别为3.23%、2.55%、7.99%和42.25%。其中乙酸乙酯相的总酚以及总黄酮含量最高，分别为16.52mg/g和10.08mg/g。猴头菇醇提物的不同极性萃取相均表现出一

5、定的抗氧化活性，在相同浓度下，乙酸乙酯相的整体抗氧化活性相对较高，其对DPPH·、·OH和ABTS+·的清除率分别可达到41.64%（2.5mg/mL）、82.84%（2.5mg/mL）和89.18%（0.5mg/mL），但对·OH的清除率稍低于石油醚相的96.85%（2.5mg/mL）。综合分析，筛选出猴头菇醇提物的乙酸乙酯萃取相进行后续分离单体化合物研究。（3）采用薄层色谱法和硅胶柱层析对猴头菇醇提物的乙酸乙酯萃取相进行粗分离，得到10个组分C1-C10，其DPPH·、ABTS+·清除能力测定结果表明，极性较大的组分表现出更高的DPPH·、ABTS

6、+·清除率，最高分别可达到50.12%（2.0mg/mL）和81.84%（100μg/mL），可考虑进行进一步分离纯化。（4）采用薄层色谱法、硅胶柱层析、半制备型HPLC和重结晶法从组分C1-C10中分离纯化得到5个单体化合物，经红外光谱、质谱、核磁共振分析确定其化学结构，分别为：油酸（Oleicacid，化合物H1）、HericenoneI（化合物H2）、正二十九烷（n-Nonacosane，化合物H3）、尿苷（Uridine，化合物H4）、HericenoneJ（化合物IH5），其中HericenoneI与HericenoneJ为猴头菇子实体的次生

7、代谢产物，属于异苯并呋喃酮衍生物。关键词：猴头菇；抗氧化成分；抗氧化活性；分离纯化；结构鉴定IIAbstractHericiumerinaceusbelongstoBasidiomycetes,Polyporales,Hydnaceae,Hericium.TherehavebeenalotofstudiesontheantioxidantsofHericiumerinaceus,mostofwhichfocusedonpolysaccharidesinHericiumerinaceus.Inthisstudy,ethanolextractionmeth

8、odwasoptimizedtoextractantioxidantsfromHericium