半枝莲多糖提取分离纯化、表征鉴定及抗氧化活性的研究论文

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1、独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果.据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得安徽大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:王志远乏瑟幽字日期:2。。7年4月25日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解安徽大学有关保留、使用学位论文的规定有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅.本人授权安徽大学可

2、以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印.缩印或扫描等复制手段保存,汇编学位论文.(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名:爹。多也导师签名:敦t艺签字日期:叩年"面签字日期.卅年‘’月;日学位论文作者毕业去向:工作单位:电话通讯地址:邮编摘要摘要半枝莲是唇形科黄芩属多年生草本植物,在我国具有悠久的药用历史。为了加强对半枝莲的综合利用,本研究以中草药半枝莲(半枝莲地上部分)为研究对象,对半枝莲多糖的提取、纯化、检测及抗氧化活性进行研究。通过单因素实验和正交试验考察了温度、时间、料液比等因素对多耱提取率的影响

3、。利用葡聚糖凝胶和离子交换层析分离技术对多糖进行纯化,经快速层析纯化系统(FPLC)和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定纯度,运用质谱考察了其单糖组成,采用体外化学模拟和体内实验对多糖的抗氧化活性进行了探讨,试验结果如下:l优化了半枝莲粗多耱提取工艺参数,得到水提最佳浸提参数为:温度70℃,时间6h,料液比1:30,浸提1次,多糖得率为2.703%。2半枝莲粗多糖经DEAE.Cellulose-52和Sepharose4B纯化,获得了两个组分SBPw和SBPs,其红外光谱均在3420(o一玛、2940‘c.琊、1665(c=o)、1445(C.o)、112

4、0(C.0)cm’1等处有多糖的特征吸收峰,并且二者在877cml处均有吸收峰,表明存在吡喃糖苷键。3苯酚硫酸法测定了SBPw和SBPs的多糖含量分别为89.60%和92.s7%;间羟联苯法测定糖醛酸含量分别为4.9%和19.6%。采用快速层析纯化系统(FPLC)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定SBPs为均一组分,并测定其相对分子质量为1.1×104Da;利用GC-MS分析其单糖组成为:鼠李祷、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,摩尔比依次为1.00:0.13:0.80:0.10:0.34:0.56:3.04。4通过化学模拟和对

5、小鼠组织和体液的体外实验,研究了SBPw和SBPs的体外抗氧化活性。采用邻苯三酚法及Fenton体系测定SBPw和SBPs对02一·和·OH的清除作用,SBPw的半数清除浓度Ic卯-sBh分别为921.73

6、lg/mL和89.26

7、lg/mL:SBPs的半数清除浓度IC鳙sBh分别为800.00ug/mL和90.42“g/mL。实验结果表明,SBPw和sBPs具有很强的清除02·和·OH生成的活性,对各种活性氧均具有抗氧化作用,具有直接清除自由基和脂质过氧化的活性,可抑制小鼠肝组织的脂质过氧化,对re2+和H202诱导的肝组织3半枝莲多糖的提取

8、分离纯化、表征鉴定及抗氧化活性研究过氧化物损伤具有保护作用,能减少红细胞溶血的发生。5半枝莲多糖SBPw和SBPs按剂量小鼠腹腔注射,qd,连续35d,以分光光度法测定小鼠血清、肝组织中的超氧化物岐化酶(soD)活力以及过氧化产物丙二醛(MDA)的含量。结果显示SBPw和SBPs能剂量依赖性提高小鼠血清、肝组织中的SOD活力,并可剂量依赖性降低小鼠血清、肝组织中MDA的水平。SBPw和SBPs表现出较好的抗氧化作用,提示其在维系体内自由基代谢平衡、延缓衰老方面具有一定的作用。关键词半枝莲;多糖:提取;纯化:表征;抗氧化4AbstractScut

9、ellariabarbataD.DonisperennialherbaceousplantandbelongstoScutellariofthefamilyLabiatae.IthasbeenusedformedicinesforalongtimeinChina.InordertostrengthenthecomprehensiveutilizationofScutellariaBarbata,ScutellariaBarbatapolysaccharide’sextraction,purificationandtheactivityofant

10、ioxidationwerestudied.Theeffectonextractionefficiencywasinvestigatedbymeans

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