猪链球菌2型四川人源分离株ZYH18纤连蛋白结合蛋白基因的克隆和序列分析

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1、4072006•22(5)文章编号：1002-2694(2006)05-0407-03猪链球菌2型四川人源分离株ZYH18纤连蛋白结合蛋白基因的克隆和序列分析王花茹2,王长军I，扈家琪陆承平2,潘秀珍I,郭恒彬I摘要：目的对2005年猪链球苗2型｛Streptococcussuistype2,S.suis2)四川资阳人源分高株ZYH18纤连畫白结合蛋白(FBPS)茏因进行克潼和序列分析。方法以ZYH18的基因组DNA为模板•采用PCR方法扩增出纤连蛋白/血纤蛋白原结合强白荃因片段，克隆于PMD-T18栽体，构建成載体pMl>T・〃ps•转化到宿主菌TG1中，进行序列测定(G

2、enBank«录号为DQ345444)。测序结果与实脸室保存的其它7株猪链球琶2型临床分高蒲株湄序结果及GenBank交序列AF438158进行编码区基因的同源性比对。结果成功克降了实脸室保存的分离于不同时间和地点的，包括ZYH18在内的8株S.suis2临床分离苗株的fbps来因，并对其编码区基因进行了同源性比对.结论实脸室保存的8株繭的FBPS编谒区荃因同源性商达100%,并不因分离时间和地点的不同而不同；与GenBank提交序列AF438158同源性为99%,存在两个氨基酸的差异。关键词：纤连餐白结合蛋白基因；猪链球菌；同源性比对；序列分析中图分类号:R535文献标识

3、码：ACloningandsequenceanalysisofgeneencodingthefibronectin-bindingproteinfromthehumanstrainofStreptococcussuisisolatedinSichuanprovinceWANGHua-ru,WANGChang-jun,TANGJia-qi,LUCheng-ping,PANXiu-zhen.GUOHeng-bin(HuadongResearchInstituteforMedicineandBiotechnicsVeterinaryMedicineCollegeofNanjing

4、AgricultureUniversity♦Nanjing21OO95tC/nna)ABSTRACT:Thegeneencodingthefibronectin-bindingproteinfromthehumanstrainZYH18ofStreptococcussuistype2isolatedfromZiyangofSichuanprovincein2005wasclonedandunderwentsequenceanalysis•inwhichthegenomicONAoftheZYH18strainwasusedastemplateandthefibronecti

5、nbindingproteingenefragmentwasamplifiedbyPCR.ThisfragmentwastheninsertedtovectorpMD-T18>andtherecombinantplasmidpMI>T-fbpswasidentifiedbyrestrictionenzymedigestionandsequencing.Homologycomparisonsofthecodingregiongeneswereundertakenamongthesequencingresultsandthoseofother7laboratory-stored

6、strainsofclinicalisolatesofS.suistype2aswellasthesequenceAF438158affordedbyGenBank.ItwasdemonstratedthatthegeneencodingthefibronectinbindingproteinfromtheZYH18strainofS

7、3.KEYWORDS:fibroncctin-bindingprotein(FBPS)sequenceanalysis;homologouscontrast猪链球菌(Streptococcus$加$)是全世界集约化养殖场巫要的病原之一⑴。目前，猪链球菌35个血清型中尤以2型致病力最强⑺耳。值得注意的是，并不是所有的S.sub2都有致病性，通常认为其致病性强弱与其表达毒力相关因子有很大关系。耳前,已知的与S.suis致病性相关的谨力因子主要有荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白(muraminidasereleasedprote