喉癌生存素表达临床特征分析

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1、喉癌生存素表达临床特征分析喉癌生存素表达临床特征分析【摘要】目的：探讨生存素(survivin)表达与喉癌发生、发展及浸润转移的关系。方法：喉癌组为65例肿瘤组织，均经病理确诊为喉鳞状细胞癌。采用免疫组织化学SABC染色法检测survivin蛋白表达情况，并进行统计分析。结果：喉癌组survivin蛋白定位于癌细胞胞浆，阳性率(51/65,78.5%)显著高于癌旁组(2/22,9.1%),淋巴转移组显著高于无转移组，不同临床分期阳性率显著不同。结论:喉癌组织中survivin表达水平较高，survivin表达与喉癌发生、发展及浸润转移有关，对喉癌的早期诊断、预后判断有意

2、义。【关键词】喉癌；生存素；免疫组织化学文章编号:1009-5519(2008)15-2250-03中图分类号：R76文献标识码：A细胞凋亡受抑制为肿瘤细胞提供生存之机，使细胞的转化突变得以保存，最终导致肿瘤的发生和演进［1］。生存素(survivin)是一种肿瘤特异性凋广抑制因子，它是凋亡抑制蛋白(inhbitorofapoptosisprotein,IAP)基因家族的一个成员，具有抑制细胞凋亡和调节细胞分裂的双重功能［2］。正常情况下survivin基因除在胎盘和胸腺组织有微弱表达之外，在成人终末分化的组织中不表达，但在病理情况下，survivin可表达于大多数恶性

3、肿瘤，在肿瘤的发病机制中起重要作用［3］。本研究应用免疫组织化学染色方法检测65例喉癌组织中survivin的表达，并对结果进行分析，以期了解survivin表达在喉癌的发生、发展和预后中的作用。1资料与方法1.1一般资料：65例患者均为本院2005年6月~2008年2月住院手术的喉癌原发病例，男40例，女25例，年龄36~78岁，平均(58.2±8.5)岁，〉60岁患者35例。所有患者均经病理确诊为喉鳞状细胞癌，肿瘤直径＞3cm33例。根据UICC1997年标准进行TNM临床分期：I+11期26例，III+IV期39例。肿瘤高中分化40例，低分化25例；伴颈淋巴结转移

4、者18例，无颈淋巴结转移者47例。喉癌发生部位：声门上型30例，声门型27例，声门下里8例。对照组癌旁组织22例取自全喉切除标本的远端组织，距肿瘤边缘＞3cmo1.2免疫组织化学染色：免疫组织化学检测采用SABC法，二氨基联苯胺(diamionbenzidene,DAB)显色。所用兔抗人survivin单克隆抗体购自美国SantaCruz公司，免疫组化检测试剂盒(SP-9000)、DAB酶底物显色试剂盒等购自北京中杉金桥生物技术有限公司。免疫组织化学染色步骤如下：标本常规石蜡包埋，5um厚组织切片，贴附在经赖氨酸处理过的载玻片上，60°C烘烤lh后二屮苯脱蜡、梯度酒精水

5、化，柠檬酸缓冲液高压锅热诱导抗原修复；3%H202抑制内源性过氧化酶作用10min；血清封闭液室温孵育20min阻断非特异抗体的着色；加一抗(1:500)4°C过夜，0.01MPBS冲洗，加生物素标记的第二抗体，37°C孵育30min,最后加入链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶，37°C孵育20min,PBS冲洗，DAB显色，HE复染，中性树胶封固。以PBS代替一抗作阴性对照。结果判定标准：胞质内有黄色及棕黄色着色者为survivin阳性染色，主要定位于肿瘤细胞胞质和胞膜中，为粗细不一的棕黄色颗粒，阳性细胞呈局灶性或弥漫性分布。在400倍视野下，任意选择5个高倍视野，每个视野至

6、少含200个细胞，阳性细胞数25%定为阳性。1.3统计学方法：所得数据以例数或百分数(％)表示，采用SPSS12.0软件包进行统计分析。2结果2.1Survivin蛋白表达免疫组化检测结果:Survivin阳性细胞胞质呈黄色或棕黄色，按阳性标准判断，喉癌组织中的survivin表达阳性例数为51例,阳性率为78.5%,癌旁组织中的survivin阳性例数为2例，阳性表达率为9.1%OSurvivin蛋白在喉癌组织和在癌旁组织中的表达差异有显著性(x2=33.223,P<0.01)o2.2喉癌组survivin蛋白表达与喉癌临床特征之间的关系：喉癌组男性40例中survi

7、vin阳性32例，女性25例中survivin阳性19例，阳性率分别为80.0%和76.0%,组间比较差异无显著性(x2二0.146,P>0.05)o喉癌组M60岁患者35例中survivin阳性28例，〈60岁患者30例中survivin阳性23例，阳性率分别为80.0%和76.7%,组间统计分析差异无显著性(x2二0.106,P>0.05)。喉癌组肿瘤23.0cm患者33例中survivin阳性25例,<3.0cm患者32例中survivin阳性26例，阳性率分别为75.8%和81.3%,统计分析差异无显著性(x2二0.290,P>0