HIV-1假病毒感染未成熟树突状细胞实验研究

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1、HIV-1假病毒感染未成熟树突状细胞实验研究朱娜刘雪丽仇妮张洁婷吴诗品李体远郭叙奎員金宁一青岛市中心医院药学部暨南大学第二临床医院，深圳市人民医院长春中医药大学基础医学院军事医学科学院军事兽医研究所，省部共建吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室摘要：目的：构建携带增强型绿色荧光蛋白基因（Enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP）的HTV-1假病毒;通过HIV-1假病毒感染未成熟树突状细胞（immaturaldendriticcell,iDC）实验探讨病毒与细胞的相互作用。方法:利用慢病毒包装系统构建携带EGFP基因的HI

2、V-1假病毒，通过RT-PCR扩增HIV-1假病毒中的EGFP基因;H1V-1假病毒感染iDC,对H1V-1假病毒感染iDC后的基因组整合和转录水平进行检测，观察被感染iDC中EGFP基因的表达。结果:构建的HIV-1假病壽通过RT-PCR结果显示扩增得到EGFP基因;HTV-1假病壽感染iDC后，在基因组整合和转录水平检测屮都扩増得到了EGFP基因，荧光显微镜观察被HIV-1假病毒感染的iDC,观察到iDC表达绿色荧光蛋口。结论:成功构建携带EGFP基因的H1V-1假病毒;H1V-1假病毒可以感染iDC,并将其遗传物质整合到iDC基因组中，并经过转录

3、和翻译使1DC表达EGFPo关键词：HIV-1假病毒;未成熟树突状细胞;感染实验;作者简介：朱娜（1986年-），女，硕士，主要从事临床药学研究，主要从事微生物与免疫方面的研究；:merryzhuna@163.com。作者简介：郭叙（1963年-）；女，博士，教授，博士生导师，主要从事微生物与免疫方面的研究;E-mail:ccguoyan@163.com。作者简介：李昌（1978年-）；男，博士，教授，副研究员，主要从事微生物与免疫方面的研究;E-mail:lichang78@163.com。作者简介：金宁一（1956年-）；男，博士，中国工程院院士，

4、博士生导师，主要从事微生物与免疫方面的研究，E-mai1:ningyij@hotmai1.comG收稿日期：2017-06-03基金：国家自然科学基金(31472197)ExperimentalstudyonimmaturaldendriticcellsinfectedbyHIV-1pseudovirusZHUNaLIUXue-LiQIUNiZHANGJie-TingWUShi-PinLITi-YuanGUOYanLIChangJINNing-YiPharmacyDepartmentoftheQingdaoCenterHospital;Abstract

5、：Objective:ToconstructI1IV-1pscudoviruscontainingcnhemcedgrccnfluorescentprotein(EGFP)gene.Tounderstandtheinteractionbetweenthevirusandthecells.Methods:HIV-1pseudoviruscontainingEGFPgenewasconstructedbylentiviralpackagingsystems,anditsEGFPgenewasamplifiedusingRT-PCR・Thelevelofge

6、nomicintegrationandtranscriptionof11IV-1psetidoviruscontainingEGFPgeneweredetectedoniDCsinfectedwithHIV-1pseudovirus.Atthesametime,researchonexpressionoftheEGFPgeneiniDCsinfectedwithHIV-1pseudoviruswasperformed.Results:TheEGFPgeneofHIV-1pseudoviruswasdetectedthroughRT-PCR.TheEGF

7、PgenewasidentifiediniDCsinfectedwithHIV-1pseudovirusthroughPCRandRT-PCR・TheEGFPwasobservediniDCsinfectedwithHIV-1pscudovirusunderfluorescencemicroscopy.Conclusion:HIV-1pseudoviruscontainingEGFPgenehasbeensuccessfullyproduced.TheHIV-1pseudovirusthatweconstructedcaninfectiDCs,then

8、itsRNAcanintegrateintothegenomeofiDCsinthewayof