HPLC-ELSD法测定蜂蜜中四种糖含量

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1、万方数据第30卷第7期甘肃科技％f．30Ⅳo．7—竺竺兰兰』—————————————垒竺竺墅丝型兰坚坚!里!垫坠坐盟：生!垫!!HPLC—ELSD法测定蜂蜜中四种糖含量王震(徐州市产品质量监督检验中心，江苏徐州221008)摘要：利用高效液相色谱一蒸发光散射检测器(HPLC—ELSD)法对蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的含量进行测定。采用氨基柱分离，乙腈一水为流动相，梯度洗脱，待测组分与其他组分分离效果良好，结果准确。精密度试验RSD满足试验要求，回收率大于95．O％。本方法可用于蜂蜜产品中糖类物质的

2、含量测定，可为糖类物质质量控制和安全评价提供科学的分析方法。关键词：蜂蜜；果糖；葡萄糖；蔗糖；麦芽糖；高效液相色谱仪(HPLC)；蒸发光散射检测器(ELSD)中图分类号：0657．3蜂蜜作为中国的传统食品，一直被人们所喜爱。目前世界上蜂蜜的消耗量在100万t左右，中国每年的蜂蜜出1：3量10万t，蜂蜜的质量一直是人们关注的重点。蜂蜜中主要成分是果糖和葡萄糖，约占总糖含量的90％左右；少量的蔗糖和麦芽糖，其中蔗糖约占4％左右，因此，糖分含量一直是蜂蜜检测中的重要指标。我国对食品中糖含量的测定已有相应的国家标

3、准方法：有化学分析法u1和高效液相一示差折光检测法[2】。传统的化学方法检测存在较大的误差H1，且分析时间较长，人为因素对实验结果影响较大；蒸发光散射检测器(ESLD)作为一种新型的检测器目前越来越多的用于食品中糖分的检测L4J。高效液相色谱一示差折光法不能进行梯度洗脱，对分离度有较大影响。且由于各种糖含量不同，稀释倍数不一致导致实验的精密度存在较大误差，本研究拟应用高效液相色谱一蒸发光散射对蜂蜜中的糖成分进行分析。1材料与方法1．1材料与试剂蜂蜜购于超市。果糖、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖标准试剂(国家标物中心

4、购买纯度≥96％)，乙腈(色谱纯，迪马公司)，超纯水(现制备现用，MiUi—Q纯水机)。1．2仪器设备1260型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)、3300型蒸发光散射检测器(ALLteeh格雷斯中国有限公司)、十万分之一天平。1．3方法1．3．1各种溶液的配制4种糖标准储备液：分别称取0．259精确至0．000019经干燥恒重的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖浆标准品于25rnL的容量瓶中，加水溶解定容至刻度。得lOmg／mL的四种糖标准储备液。1．3．2色谱条件色谱柱i氨基柱(4．6mmX250mm，2．51

5、axn)流动相：乙腈：水=87+13流速：1．0mlMmin柱温：室温ELSD参数：漂移管温度：55℃；氮气流速：1．8mL／min。1．3．3样品处理准确称取蜂蜜样品lg(准确称取)于50raL的容量瓶中加水溶解定容至刻度，摇匀，待测。2结果与分析2．1分析条件的选择由于果糖和葡萄糖同属单糖，蔗糖和麦芽糖同属双糖，分离难度较大，提高乙腈的含量能加快分离过程，但会造成果糖和葡萄糖部分重叠，为了提高分离速度和分离效果，本实验采用乙腈：水(87+13)，流速为1．0mL／min，进样量20止，检测器为ELSD

6、，漂移管温度为：55℃，氮气流速为1．8mL／min。2．2标准曲线的制备2．3样品的测定将1．3．3制备好的蜂蜜样品，按照1．3．2节的条件洗进行设置色谱条件，谱图如图l所示。结果表明，样品中四种糖能够得到很好的分离，色谱图基线稳定。增益对其结果影响较小。万方数据54甘肃科技第30卷mVEL$1A,州均_一口∞日黼'，∞{—r口口．肛2flt$-06-21，'‘筠舢1日10'研图14种糖标准谱图2．4精密度实验对4种糖标准溶液，重复进样6次，以峰面积计算精密度，见表1，RSD介于0．04～0．27，满足

7、分析要求。表1精密度实验结果2．5回收率实验在蜂蜜中添加不同质量浓度的4种糖混合标准溶液，其添加量分别为20mg，40mg，60mg。按照1．3．3处理方法处理样品，按照1．3．2的色谱条件进样，上机测定，计算出样品加标回收率，其结果见表2。表2方法回收率结果表明，样品中4种糖的加标回收率均能满足检测要求，回收率较好，可用于蜂蜜产品的测定。3结论本实验建立了同时测定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的高效液相色谱一蒸发光散射检测方法，结果表明，该方法的精密度、准确度较高，无其他杂质干扰，可用于蜂蜜产品中糖类

8、物质的含量测定，可为糖类物质质量控制和安全评价提供科学的分析方法。参考文献：[1]SN／T0852—2012，进出口蜂蜜检验规程[G]．[2]GB／T22221—2008，食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定[G]．[3]吴艳华，刘伟，郭华．HPLC内标法与化学法测定蜂蜜中糖含量的比较[J]．应用科技，2001，28(8)：55—56，59．[4]朱群英，江勇，甘钰．HPLC—ELSD法同时测定食品中五种糖[J]．食品