苯酚-硫酸法测定菊苣根中总糖含量

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1、苯酚-硫酸法测定菊苣根中总糖含量【摘要】目的：研究菊苣根总糖的测定方法。方法：采用苯酚-硫酸法，在488nm处测菊苣根中总糖的含量。结果：回归方程为Y=10.908X-0.13264，r=0.9999，线性范围为30-80μg/ml。平均回收率为103.27%，RSD=2.20%。菊苣根中平均总糖含量为平均含量为34.613mg/g。结论：方法简便，结果准确，为菊苣根总糖的进一步研究奠定良好的基础。【关键词】：菊苣根总糖苯酚-硫酸法【中图分类号】R28;R92;【文献标识码】B【文章编号】1007-8517(2008)4-0012-02菊苣根为菊科植物

2、毛菊苣(CichoriumglandulosumBoiss.etIIout)及菊苣(CichoriumintybusL.)干燥的根。菊苣系维吾尔族习用药材，维吾尔语名为卡申纳，有清肝利胆､健胃消食､利尿消肿之功效[1]。《中国药典》2000年版一部只收载其地上部分。菊苣根主要含有三萜､倍半萜､有机酸等类成分[2-4]。现代药理研究表明，菊苣根具有改善消化器官活动机能､改善心脏功能､保肝降脂､降血糖和抗菌等作用[5]。为了确定菊苣根总糖的含量，本文利用苯酚-

3、硫酸法制得醛糖衍生物，采用分光光度法对菊苣根总糖含量进行测定。51仪器与试药SpectrumLab54分光光度计(上海棱光技术有限公司)，RE52CS-2旋转薄膜蒸发仪(上海亚荣仪器厂)，KQ-400DBC超声清洗仪(昆山市超生仪器有限公司)，BS110S分析天平(北京，赛多利斯)，DZF-6021型真空干燥箱(上海精宏实验设备厂);其它所用试剂均为分析纯。菊苣根采自新疆乌鲁木齐市南山，经新疆自治区中医医院李永和主任药师鉴定为菊科植物菊苣(CichoriumintybusL.)的干燥根。2方法与结果2.菊苣根总糖的提取：菊苣根干燥，粉碎过20目筛，精密

4、称取药材粉末10g，用石油醚索氏回流提取4h，药渣在50℃减压干燥至干。然后精密称取脱脂后的药渣3g，加蒸馏水100mL，回流提取3次。每次20min，过滤，合并滤液并定容至200ml，得0.015g/ml的总糖提取液，备用。2.对照品溶液的制备：精密称取葡萄糖对照品100mg，置100ml量瓶中，蒸馏水定容，配成1mg/ml的对照品溶液，备用。2.3供试品溶液的制备：精密量取上述菊苣根总糖提取液1ml于10ml具塞试管中，加入6%苯酚溶液1ml，振摇，迅速加入浓硫酸4ml，混合均匀，蒸馏水定容至刻度，静置10min，冷水迅速冷却至室温，备用。精密量取

5、蒸馏水1ml同样操作，作为空白对照。52.4测定波长的确定：取供试品溶液､对照品溶液和空白对照溶液，400-700nm波长扫描，供试品溶液与对照品溶液在488nm处有最大吸收。空白对照无干扰。故确定488nm为测定波长，结果见图1。2.5标准曲线的制备：分别精密量取对照品溶液30､40､50､70､80μl于10ml具塞试管中，各加入6%苯酚溶液1ml，摇匀，迅速加入浓硫酸4ml，混合均匀，蒸馏水定容至刻度，静置10min，冷水迅速冷却至室温。按分光光度法在488nm处测定吸光度。以

6、吸收度(A)对浓度(C)做线性回归计算，得回归方程：Y=10.908X-0.13264，r=0.9999(n=5)。结果表明在30-80μg/ml范围内线性关系良好。2.6精密度实验：精密吸取供试品溶液，连续测定4次，RSD=1.09%，表明仪器精密度良好。2.7稳定性实验：精密吸取同一新制备的供试品溶液，每隔10分钟测定一次，连续测定3次。RSD=1.35%，表明样品在30分钟之内稳定。2.8重复性实验：精密吸取同一批菊苣根总糖提取液3份，制备供试品溶液，按“供试品溶液的制备”项下处理并测定。结果RSD=1.25%。表明本法有较好的重复性。2.95回

7、收率实验：精密吸取已知浓度的菊苣根总糖提取液6份，分别加入高､中､低三种浓度不同的对照品溶液，制备供试品溶液，按“供试品溶液的制备”项下处理并测定。结果平均回收率为103.27%，RSD=2.20%，见表1。2.10样品测定：连续测定3批菊苣根总糖提取液样品，平均含量为34.613mg/g，见表2。3讨论6%苯酚溶液易被氧化，实验时应现配现用。制备标准曲线时，葡萄糖浓度不应过高，加入浓硫酸不应过多，否则容易碳化。测定样品时应在30分钟内完成，时间过长，样品的稳定性降低，影响测定数值的准确性。参考文献[1]刘勇民.维吾尔药志(

8、上)[M].乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社，1999：471[2]何轶，郭亚健，高云艳.菊苣根化