稻瘟病菌一个假定的漆酶基因功能分析

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1、维普资讯http://www.cqvip.com分子植物育种，2008年，第6卷，第4期，第765—769页MolecularPlantBreeding，2008，Vo1．6，No．4，765—769新基因、新品质、新品种NewGene&Germplasm稻瘟病菌一个假定的漆酶基因功能分析刘文德1陈新赵传志2刘淑集2MinooRazee2鲁国东1壬宗华121福建农林大学植物保护学院，福州，350002；2福建农林大学生命科学学院，福州，350002通讯作者．zonghuaw@163．com摘要漆酶可能是病原真菌毒力因子之一。稻瘟病菌基因组共有16个假定的漆酶类基因，

2、对其中的MggO0551．5进行了生物信息学和分子遗传学分析，以明确其功能。生物信息学分析表明该漆酶是具有3个_多铜氧化酶结构域、可以分泌到胞外的蛋白。经基因敲除表明，Mgg00551．5功能缺失突变体AMG0551一13．的漆酶活性比野生型菌株稍低，但是其生长速度、产孢能力、致病性等方面与野生型菌株相比均无明显差异，可能是功能冗余所致。进一步的双突变或多突变可能是明确漆酶功能的重要方法。关键词稻瘟病菌，漆酶，基因敲除，功能分析FunctionalAnalysisofaPutativeLaccaseGeneinMagnaporthegriseaLiuWendeChe

3、nXinZhaoChuanzhiLiuShujiMinooRazeeLuGuodongWangZonghua。1TheCollegeofPlantProtection，FujianAgricultureanctForestryUniversity,Fuzhou,350002；2TheSchoolofLi~Sciences，FujianAgricultureandForestryUniversity，Fuzhou，350002Correspondingauthor，zonghuaw@163．comAbstractLaccasemayworkasavirulencefa

4、ctorinfungalpathogenesis．Thereare16laccasegenesannotatedintheMagnoporthegriseagenomedatabase．Inthisstudy，weappliedbioinformaticsandgeneknock—outtechniquestostudythefunctionoflaccasegeneMggO0551．5inthefungus．Bioinformaticsanalysisshowedthatthegene_encodesaproteinwiththreedomainsofpoly—c

5、opperoxidaseandbeingsecretedintoextra—cellularcompartment．Aslightdecreaseoflaccaseactivitywasobservedingeneknock—outmutantz~IG0551—13，whencomparedtowild—typestrain．However，themutantwasnotafectedingrowthrate，conidiationandpathogenicitY,probablyonaccountofthegeneredundancyoflaccaseinthef

6、ungus．Furthercharacterizationbasedondoubleormultipledeletionsarenecessarytofindoutthefunctionoflaccaseinthefungalpathogenesis．KeywordsMagnoporthegrisea,Laccase，Geneknock—out，Functionalanalysis漆酶是一种含铜多酚氧化酶，由于首次从日本Larsoneta1．，1992)，也有报道表明漆酶与植物病原真漆树(Rhusvenic泷ra)的汁液中分离而得名(Yoshida，菌板栗疫病菌(C

7、ryphonectriaparasitic致病性的降1883)，能够催化酚类物质的氧化还原反应，使之生成低有关(Choieta1．，1992)。此外，在对动物病原真菌新相应的苯醌和水(季立才和胡培植，1996；Yavereta1．，生隐球菌(CryptocOCCU8．~oform1毒力机理的研究1996)。随后人们发现一些高等真菌也能分泌这种酶。中也发现漆酶在其致病过程中起作用(Liueta1．，最新研究表明，细菌也可产漆酶。漆酶在不同物种中1999；Nosanchuketa1．，2000；Zhueta1．，2003)，因此，发挥不同的功能。在昆虫中，它们参与甲