[生物工程精品]粗毛栓菌漆酶的酶谱分析

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1、XXX本科生毕业设计（论文）题　　目粗毛栓菌漆酶的酶谱分析姓　　名XXX学号XXX系别生命科学系专　　业生物科学指导教师XXX职称教授2010年月日XXX教务处制目录摘要………………………………………………………………………………1关键词………………………………………………………………………………1Abstract……………………………………………………………………………1Keywords………………………………………………………………………1引言…………………………………………………………………………………11实验材

2、料…………………………………………………………………………11.1.1仪器………………………………………………………………………11.1.2试剂………………………………………………………………………11.1.3菌种…………………………………………………………………………21.1.4PDA培养基…………………………………………………………………21.1.5粗酶液的制备……………………………………………………………21.1.6等电聚焦酶谱分析…………………………………………………………21.1.7胶体溶液的配制………………

3、………………………………………………22实验方法…………………………………………………………………………22.2.1装管…………………………………………………………………………22.2.2装槽…………………………………………………………………………22.2.3电泳………………………………………………………………………22.2.4剥胶………………………………………………………………………22.2.5显色………………………………………………………………………32.2.6拍照…………………………………………………………………

4、…33.结果与讨论………………………………………………………………………33.3.1漆酶酶谱……………………………………………………………………33.3.2讨论………………………………………………………………………3参考文献……………………………………………………………………………3致谢…………………………………………………………………………………4粗毛栓菌漆酶的酶谱分析生物科学专业学生XXX指导教师XXX摘要将粗毛栓菌接种在含有麦草粉的培养基中培养30d，浸提得粗酶液透析，将粗酶液进行等电聚焦后与愈创木酚反应获得漆酶

5、酶谱。关键词粗毛栓菌，漆酶，等电聚焦，酶谱TomographyforTrametesgallica,'sLaccaseAbstractDiametergallerywascultivatedinwheatpowderfor30days.Thecrudeenzymewasextractionedanddialysised,thenthecrudeenzymewasreactionwithguaiacolaftertheisoelectricfocusingtoobtainthetomography.KeywordsTra

6、metesgallica,laccase,isoelectricfocusing[IEF]，Zymogram引言漆酶是一种含铜的多酚氧化酶[1]，最早是从日本的漆树汁中发现的，是人类最早发现的酶之一，但直到现在，人们对它的认识还不完整[2]。近年来，随着漆酶功能的逐步发现，有关漆酶的研究受到普遍的重视。由于在降解木质素方面的功能，使之在制浆造纸工业，特别是纸浆生物漂白领域得到深入的研究和开发[3,4]，在环保方面也有很大的潜力[5]，可与有毒的酚类作用，使含苯氧基类的除草剂、石油化工废物的物质解去毒性等[6]。随着应用

7、的不断加深，漆酶的研究和开发越来越受到人们的关注[7]。本文就以漆酶的粗酶液进行等电聚焦测定其同工酶谱。1实验材料1.1.1仪器圆盘电泳DYCZ-27DYY-8C型电泳仪（北京六一仪器厂）玻璃管长10cm，内径0.5cm8-10个烧杯40ml一个烧瓶50ml一个培养皿一套电子天平移液枪玻璃棒容量瓶500ml两个量筒1.1.2试剂丙烯酰胺（29g/100ml）甲叉双丙烯酰胺（1g/100ml）两性电解质Ampholine（40%、pH3-10）（50mg/ml）过硫酸铵（0.5mg/ml）TEMED（1mg/ml）H2S

8、O4（0.4%）500mlNaOH（0.4%）500ml琼脂糖（0.7g/100ml）愈创木酚0.02mmol/1.1.3菌种菌种是由XXXXXX博士提供。从山东菏泽树木上采集分离所得。经鉴定为粗毛栓菌Trametesgallica。1.1.4PDA培养基称取去皮马铃薯200g/L，加适量水煮沸20min，用纱布过滤得滤液，加入葡