[生物工程精品] 粗毛栓菌漆酶的酶谱分析

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1、XXX本科生毕业设计(论文)题  目粗毛栓菌漆酶的酶谱分析姓  名XXX学号XXX系别生命科学系专  业生物科学指导教师XXX职称教授2010年月日XXX教务处制目录摘要………………………………………………………………………………1关键词………………………………………………………………………………1Abstract……………………………………………………………………………1Keywords………………………………………………………………………1引言…………………………………………………………………………………11实验材料…………………………………………

2、………………………………11.1.1仪器………………………………………………………………………11.1.2试剂………………………………………………………………………11.1.3菌种…………………………………………………………………………21.1.4PDA培养基…………………………………………………………………21.1.5粗酶液的制备……………………………………………………………21.1.6等电聚焦酶谱分析…………………………………………………………21.1.7胶体溶液的配制………………………………………………………………22实验方法…………………………

3、………………………………………………22.2.1装管…………………………………………………………………………22.2.2装槽…………………………………………………………………………22.2.3电泳………………………………………………………………………22.2.4剥胶………………………………………………………………………22.2.5显色………………………………………………………………………32.2.6拍照……………………………………………………………………33.结果与讨论………………………………………………………………………33.3.1漆酶酶谱……………

4、………………………………………………………33.3.2讨论………………………………………………………………………3参考文献……………………………………………………………………………3致谢…………………………………………………………………………………4粗毛栓菌漆酶的酶谱分析生物科学专业学生XXX指导教师XXX摘要将粗毛栓菌接种在含有麦草粉的培养基中培养30d,浸提得粗酶液透析,将粗酶液进行等电聚焦后与愈创木酚反应获得漆酶酶谱。关键词粗毛栓菌,漆酶,等电聚焦,酶谱TomographyforTrametesgallica,'sLaccaseAbstractD

5、iametergallerywascultivatedinwheatpowderfor30days.Thecrudeenzymewasextractionedanddialysised,thenthecrudeenzymewasreactionwithguaiacolaftertheisoelectricfocusingtoobtainthetomography.KeywordsTrametesgallica,laccase,isoelectricfocusing[IEF],Zymogram引言漆酶是一种含铜的多酚氧化酶[1],最早是从日本的漆树汁中发

6、现的,是人类最早发现的酶之一,但直到现在,人们对它的认识还不完整[2]。近年来,随着漆酶功能的逐步发现,有关漆酶的研究受到普遍的重视。由于在降解木质素方面的功能,使之在制浆造纸工业,特别是纸浆生物漂白领域得到深入的研究和开发[3,4],在环保方面也有很大的潜力[5],可与有毒的酚类作用,使含苯氧基类的除草剂、石油化工废物的物质解去毒性等[6]。随着应用的不断加深,漆酶的研究和开发越来越受到人们的关注[7]。本文就以漆酶的粗酶液进行等电聚焦测定其同工酶谱。1实验材料1.1.1仪器圆盘电泳DYCZ-27DYY-8C型电泳仪(北京六一仪器厂)玻璃管长10cm

7、,内径0.5cm8-10个烧杯40ml一个烧瓶50ml一个培养皿一套电子天平移液枪玻璃棒容量瓶500ml两个量筒1.1.2试剂丙烯酰胺(29g/100ml)甲叉双丙烯酰胺(1g/100ml)两性电解质Ampholine(40%、pH3-10)(50mg/ml)过硫酸铵(0.5mg/ml)TEMED(1mg/ml)H2SO4(0.4%)500mlNaOH(0.4%)500ml琼脂糖(0.7g/100ml)愈创木酚0.02mmol/1.1.3菌种菌种是由XXXXXX博士提供。从山东菏泽树木上采集分离所得。经鉴定为粗毛栓菌Trametesgallica。1.

8、1.4PDA培养基称取去皮马铃薯200g/L,加适量水煮沸20min,用纱布过滤得滤液,加入葡

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