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1、万方数据江苏农业科学2007年第t期茶叶蛋白的提取工艺研究邹小明,谢骞,朱立成,肖眷玲,曾建忠(并丽由孥院生命辩学学院,江秀舂安343009)摘要:为’r提高茶资源的幂
2、j孀率,开展不闻方法提取茶梗中鬃自的磷究。缭梁表瑟,碱溶后再避行酶解的工艺提取茶殛自效率最高。该工艺的最佳条件为:碱洛pH缀12,温度75屯,时间50min,固液比1:40;再次酶提的p珏值9,温度30℃,时闻60min,酶用量1500U/g。在该条件下茶蛋白样品中蛋白质含量为60.4%,蛋白质提取率为8l。83%。关键词:酶;
3、茶叶蛋自;提取中圈分类号:TS210.9文献标识码:A文章编号:1002—1302《2007)01—0169—03我国是世界上最大的茶叶生产国、消费国和出瞬国之一,2003年中国茶叶的生产量为768140t,位居世界第二,具有丰富的茶叶资源⋯。现阶段却存在茶叶资源利用水平不高的问题。在优质茶叶的生产过程中鸯大量的茶梗、茶渣和茶末,提离这些茶资源的利用率将具有很高的经济价值和社会价值。弼时,茶叶中蛋崮爱含整占茶叶于重的15%一30%,大多为非水溶性的谷蛋自,它不仅具有营养鼎质,还具有较强的清除氧崮
4、由基的能力瞄。。,可以作为保健饮料开发。目前,有关研究报道集中于茶叶簧白的单一碱溶法提取工艺研究H1,该法存在提取效率不窟、所得的蛋自水溶性不强等缺点。如果要实际应用还需另外开展酶法或者酸法改性工作呤j。本礤究泼低辎茶梗隽原料。探索先碱溶后酶解的方法制备茶叶蛋白,将蛋白的提取和改性两分离的工艺进行耦合,以期能在高效提取茶叶蛋白的同时该蛋白也有较好的蛋自性能,为茶叶中的蛋自质资源商效利用开展基础性研究。1材料与方法1.1材粹与仪器1.1.1原料与试剂茶梗:井冈山玉叶有机茶叶公谣提供,水分含量7.5
5、2%,蛋白质含量20.7l%;食晶级碱性蛋龟酶:广西南宁东恒华道生物有限公司生产,活力1.0×10’U/g。收稿日期:2006一10—23作者简介:邹小嚼(1980一),男,江西信丰人,讲师,主要从事微生物技术及天然资源利用研究。Tel:(0796)8100493;E—mail:jxzxm98@126.tom。1.1.2试验仪器DS一1型高速组织捣碎机,JJ一1精密电动搅拌器,LGJ一10型冷冻干燥视,MettlerToled0320型pH计,HH—Z~S型恒温水浴锅,XHF—l型内切式匀浆机,
6、721分光光度计,LD5一lO型离心机。1.2试验方法1.2。l茶叶蛋自韵提取方法1.2.1.1碱溶法提取茶叶蛋白干燥的茶梗_按l:50添加碱液提取,控制提取pH值13、碱溶温度85℃、碱溶时间∞min呻过滤后离心(3000r/rain)10min一取上清液叶调节pH值至4.515』_沉淀、离心(3000r/rain)10min一干燥一茶叶缀自粗是。以该方法确定的单因素开展复合法提取茶叶蛋囱的研究。1。2.1.2复合法提取茶叶蛋自干燥的茶梗_碱溶(采用碱溶法的最佳条件)叶调节pH值为9,温度50
7、℃,添加0.1g碱性蛋自酶(每5g茶梗)酶解60min_过滤后离心(3000r/rain)10min一取上清液_调节pH值至4.5一沉淀、离心(3000r/min)10戚n一干燥_茶叶蛋自糨晶。以该方法确定的酶提单因素开展单一碱性蛋白酶提取茶叶蛋白的研究。1.2.1.3酶法提敬茶叶蛋鑫调节pH俊和温度,碱性蛋白酶酶解一定时间_过滤后离心(3000r/min)loIllin一取上清液_调节pH德为4,5_沉淀、离心(3000r/rain)10越n_干燥_÷茶叶蛋匙粗品。1.2.2蛋白质含量的测定采
8、用凯氏定氮法(GB5511—1985)、双缩躲法测定。2结果与分析2.1碱溶法提取茶叶蛋白的单因素试验2.1.1碱溶pH值对茶叶蛋白提取率的影响按万方数据一170一江苏农业科学2007年第1期试验方法,开展碱溶pH值对于蛋白提取率的影响,试验结果如图1所示。由图1可知,当碱溶pH值小于12时,提高pH值对蛋白的提取影响较大;碱溶pH值大于12时,pH值的改变对提取效率影响较小;在碱浓度过高的条件下,可溶性蛋白会发生美拉德反应M],同时氨基酸之间有可能发生脱水缩合反应,生成赖氨酰丙氨酸等对人体有害
9、的物质。所以选择在较低pH值下进行碱溶是必要的,最佳是碱溶pH值为12。60孓50斟盛裂4030碱溶pH值图1碱溶pH值对茶叶蛋白提取率的影响2.1.2碱溶温度对茶叶蛋白提取率的影响图2表明,在75℃和80℃两个温度下,蛋白提取效率差别不大。从工业应用考虑,我们选择75℃为最佳碱溶温度。零瓣50釜璐407075808590碱溶温度(℃)图2碱溶温度对茶叶蛋白提取率的影响2.1.3碱溶时间对茶叶蛋白提取率的影响碱溶时间达50min后,继续碱溶并没有明显提高茶叶蛋白的提取效率(图3),因此最佳碱溶时
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