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《猪主动脉脱细胞基质的简化制备及生物学评价》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、·364·ChineseJournalofReparativeandReconstructiveSurgery,March2008,Vol.22,No.3猪主动脉脱细胞基质的简化制备及生物学评价112张建吴英锋陈亮【摘 要】 目的应用酶法制备猪主动脉脱细胞基质，并评价其生物学性能。 方法 取新鲜屠宰的16根肉猪降主动脉，长10～12cm，应用0.1%胰蛋白酶和0.01%EDTA于37℃震荡条件下脱除细胞成分，HE和Masson染色行脱细胞基质的组织学观察，扫描电镜和透射电镜观察超微结构改变。应用单轴拉伸方法比较脱细胞前和脱细胞后48、96和120
2、h时材料两断端厚度、极限抗张强度（ultimatetensionstress，UTS）和断裂伸长率（strainoffailure，SOF），绘制应力-应变曲线。取成年杂种犬3只，体重20～30kg，雌雄不限。将脱细胞前后片状主动脉基质埋植于犬脊柱两侧皮下，分别于埋植后1、3和6周取材，行HE染色观察，参照半定量的Wakitani评分法，对取材时的大体形态、浸润细胞种类和数量、新生血管等指标进行比较，观察宿主炎性细胞反应和脱细胞基质变化。将犬内皮细胞种植于猪脱细胞基质，HE染色和扫描电镜观察细胞相容性。 结果HE染色和电镜检查显示在96h可将新鲜猪
3、主动脉细胞成分脱除，Masson染色显示细胞外纤维成分保留完整。脱细胞前后的动脉基质厚度、UTS和SOF差异均无统计学意义（P>0.05），但UTS显示降低趋势，SOF则呈现增加趋势，应力-应变曲线呈现力学强度降低和延展性增加的变化趋势。犬皮下埋植，各组脱细胞标本炎性细胞浸润明显减轻，6周时以成纤维细胞浸润为主，且基质中见新生毛细血管。半定量组织学评分，在大体观察、浸润细胞种类和数量方面与脱细胞前比较有统计学意义（P<0.05）；新生血管数量比较，差异无统计学意义（P>0.05）。HE染色和扫描电镜显示种植的内皮细胞可在基质表面形成单细胞层。 结论
4、应用0.1%胰蛋白酶和0.01%EDTA持续振荡96h制备的猪主动脉脱细胞基质，在生物力学、免疫原性和细胞相容性方面可满足血管组织工程的需要。【关键词】组织工程猪主动脉脱细胞基质生物力学免疫原性中图分类号：R322.121R35文献标志码：ASIMPLIFIEDPREPARATIONANDRELATIVEEVALUATIONOFDECELLULARIZEDPORCINEAORTIC1121SCAFFOLD/ZHANGJian,WUYingfeng,CHENLiang.DepartmentofVascularSurgery,XuanwuHospita
5、l,Capital2MedicalUniversity,Beijing,100053,P.R.China;NationalInstitutefortheControlofPharmaceuticalandBiologicalProducts.Correspondingauthor:ZHANGJian,E-mail:xwhvs@163.com【Abstract】ObjectiveToinvestigatethefeasibilityofapplyingenzymaticmethodtopreparedecellularizedporcineaorta
6、andtoevaluateitsbiomechanicalproperties,immunogenicityandcellcompatibility.Methods0.1%trypsin-0.01%EDTAwasappliedtoextractcellsfromporcineaortaunder37℃continuouslyvibratingconditionanditshistologyandmicrostructurewereobserved.Thethickness,stress-straincurve,ultimatetensionstre
7、ss(UTS)andstrainoffailure(SOF)werecomparedbeforeandafterdecellularizationfor48,96and120hoursunderuniaxialtensiletests,respectively.Thehistologicalchangewasobservedat1,3and6weeksafterthedecellularizedtissuewasimplantedsubcutaneouslyin3dogs.AccordingtotheHEstainsandasemi-quantit
8、ativeWakitanigradingmethod,grosschanges,categoryandamountsofi
