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《高效液相色谱法同时测定海产品中四种抗生素的分析方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第33卷第5期北京化工大学学报Vol.33,No.52006年JOURNALOFBEIJINGUNIVERSITYOFCHEMICALTECHNOLOGY2006高效液相色谱法同时测定海产品中四种抗生素的分析方法12213王 覃 陈大舟 汤 桦 李 蕾(11北京化工大学理学院,北京 100029;21国家标准物质研究中心,北京 100013)摘 要:建立了同时检测海产品中土霉素、四环素、金霉素、氯霉素残留的高效液相色谱分析方法,以醋酸铵-醋酸/水缓冲液和乙腈作为流动相,通过二元梯度洗脱,使四种抗生素获得了较好的分离,以基线噪音的3倍计算,土霉素、四环素、金
2、霉素、氯霉素的最低检出浓度分别为32、15、23、19μg/kg,在添加浓度范围内,四种抗生素的加标回收率为76%～92%,相对标准偏差为018%～415%,该方法快速、灵敏、准确,可靠性高,可用于海产品中抗生素残留的色谱分析。关键词:抗生素;液相色谱;分离;检测;海产品中图分类号:O656122确定了以醋酸铵缓冲液和乙腈在梯度洗脱的条件下引 言对四种抗生素进行色谱分离,通过配有紫外检测器抗生素是某些微生物代谢过程中产生的能抑制的液相色谱仪对四种抗生素进行同时检测,结果表或杀灭其他病原微生物的化学物质,可用于预防和明四种组分不仅完全分离,而且分析时间短,并
3、具有治疗动物疾病,因而被广泛应用。但是动物组织中较高的检测灵敏度,这对抗生素残留的检测具有重抗生素的残留会影响食用者的健康,如:四环素类抗要意义,可用于海产品中抗生素残留的检测,国内外生素的毒性作用表现在降解产物具有溶血或肝毒的尚鲜见报道。作用,对胃肠和肝脏具有一定的损害;氯霉素可抑制1 实验部分骨髓造血细胞线粒体内蛋白质的合成,引起再生障[1]碍性贫血而导致死亡。因此,抗生素的残留对人111 主要试剂和仪器体健康所造成的危害已引起世界范围广泛关注。德国LumtechK22600高效液相色谱仪,配可变目前监测海产品中土霉素、四环素、金霉素、氯波长紫外检测器
4、;四元低压混合单元泵。离心机,型[2]霉素的方法多为微生物法,灵敏度较低,检测周号为Durafuge100;固相萃取柱型号为LC218柱3期长,难以定量,具有一定的局限性。此外,酶联免mL(Supelco公司);固相萃取装置,型号14602(Lida[324]疫法、放射分析法、液2质谱联用法及气2质谱联公司)。[526]用法等方法,虽灵敏度高,但操作复杂,成本较四种抗生素标准品分别为土霉素(OTC,含量为高,难以广泛推广使用,因此,建立一种简单快速、灵9710%)、四环素(TC,含量为9510%)、金霉素敏度高且成本较低的检测方法势在必行。(CTC,含量为
5、9510%)、氯霉素(CAP,含量为本文采用磷酸二氢钠2EDTA2柠檬酸的缓冲液9910%),由国家标准物质研究中心提供,采用重量(pH=410)提取,并应用C18固相萃取柱富集净化,法配置。试剂:甲醇(HPLC级,Fluka公司);乙腈(HPLC收稿日期:2006203207级,BakerJT公司);冰醋酸(分析纯,Fluka公司);基金项目:国家“十五”重点科技攻关项目(2002BA906A282醋酸铵(分析纯,北京益利精细化学品有限公司);1B)第一作者:女,1980年生,硕士生EDTA(纯度≥99%,北京欣经科生物技术有限公3通讯联系人司);磷酸二
6、氢钠(分析纯,天津市化学试剂六厂三分E-mail:lilei@mail.buct.edu.cn厂);柠檬酸(分析纯,北京化工厂);水为超纯水。第5期 王 覃等:高效液相色谱法同时测定海产品中四种抗生素的分析方法·91·112 标准溶液及流动相的配制表1 测定土霉素、四环素、金霉素、氯霉素的梯度洗脱条件11211 土霉素、四环素、金霉素、氯霉素标准储备液Table1Optimalelutionconditionforthedeterminationofoxytetracycline,tetracycline,chlortetracyclinea
7、nd的配制 分别称取1100mg土霉素、四环素、金霉choramphenicol素、氯霉素标准品置于四个100mL锥形瓶中,分别时间/minφ(醋酸铵2醋酸3/水)/%φ(乙腈)/%加入10010g甲醇溶解,此时各溶液浓度均为010101009010mg/g,安瓿瓶分装熔封后置于冰箱4℃下保存。2100851511212 混合标准液的配制 分别以移液管吸取土71007030霉素、金霉素标准储备液各2100mL,四环素、氯霉素标准储备液各1100mL,置于10mL的安瓿瓶中,151007030加入4100mL甲醇,此时溶液中各组分浓度分别为:20100901
8、0土霉素210μg/g、四环素110μg/g、金霉素210μg/g
