豚鼠I型前庭毛细胞胆碱能受体通道特性

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1、生理学报ActaPhysiologicaSinica,June25,2008,60(3):375-381375http://www.actaps.com.cn研究论文豚鼠I型前庭毛细胞胆碱能受体通道特性朱云,孔维佳*,夏交,张宇,程华茂,郭长凯华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科,武汉430022摘要:本文旨在探讨豚鼠I型前庭毛细胞上有无胆碱能受体存在,并对其相应的离子通道特性进行研究。应用全细胞膜片钳技术检测急性分离的豚鼠I型前庭毛细胞对乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)的反应。结果

2、显示,7.5%(21/279)的I型前庭毛细胞对10~1000μmol/LACh敏感,引发明显的外向电流。该电流对ACh的反应呈浓度依赖性,半数激活浓度(EC50)为(63.78±2.31)μmol/L,但该电流为非电压依赖性。在-50mV钳制电压和正常细胞外液中,100μmol/LACh激活一持久缓慢的外向电流,电流幅值为(170±15)pA,该电流幅值依赖于胞外钙离子浓度,可被胞外给予的钙依赖性钾通道拮抗剂TEA阻断。I型前庭毛细胞的再次激活时间不小于1min。长时间暴露在ACh的情况下,受体离子通道

3、不会发生自发性关闭。以上结果提示,部分豚鼠I型前庭毛细胞上存在胆碱能受体,胞外给予ACh可激活一持久缓慢的外向电流,其胆碱能受体通道对于ACh的作用呈浓度依赖性和外钙依赖性、非电压依赖性或失敏性。本研究结果对于阐明前庭传出神经的功能及其作用机制,证实并揭示I型前庭毛细胞上存在传出神经递质受体以及日后临床指导眩晕疾病的康复治疗具有重要的意义。关键词:乙酰胆碱;前庭;毛细胞;内耳;膜片钳技术中图分类号:Q437;R339.16Propertiesofcholinergicreceptor-mediatedio

4、nchannelsontypeIvestibularhaircellsofguineapigsZHUYun,KONGWei-Jia*,XIAJiao,ZHANGYu,CHENGHua-Mao,GUOChang-KaiDepartmentofOtorhinolaryngology,UnionHospital,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430022,ChinaAbstract:Toconfirmthee

5、xistenceofcholinergicreceptorsontypeIvestibularhaircells(VHCsI)ofguineapigsandtostudythepropertiesofthecholinergicreceptor-mediatedionchannelsonVHCsI,electrophysiologicalresponsesofisolatedVHCsItoexternalAChwereexaminedbymeansofwhole-cellpatch-clamprecord

6、ings.Theresultsshowedthat7.5%(21/279)VHCsIwerefoundtobesensitivetoACh(10-1000μmol/L).AChgeneratedanoutwardcurrentinasteady,slow,dose-dependent[EC50was(63.78±2.31)μmol/L]andvoltage-independentmanner.Instandardextracellularsolution,AChattheconcentrationof10

7、0μmol/Ltriggeredacalcium-dependentcurrentof(170±15)pAatholdingpotentialof-50mV,andthecurrentamplitudecouldbedepressedbyextracel-lularlyaddedcalcium-dependentpotassiumchannelantagonistTEA.ThetimeintervalforthenextcompleteactivationofACh-sensitivecurrentwas

8、nolessthan1min.TheionchannelsdidnotshutoffevenwhentheywereexposedtoAChforanextendedperiodoftime(8min).Theresultssuggestthatdose-dependent,calcium-dependentandvoltage-independentcholinergicreceptorswerelocatedonafewo

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