大黄素对豚鼠胃窦平滑肌细胞l-型钙通道电流的影响

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时间:2019-02-25

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1、大黄素对豚鼠胃窦平滑肌细胞L.型钙通道电流的影响计:学位论文:29页表格:1个插图:7幅法欣欣指导教Oil.段志军教授申请学位级别:硕士学位专业名称:内科学论文提交日期:2012年4月论文答辩日期:2012年5月学位授予单位:大连医科大学学位授予日期:2012年6月评阅人:答辩委员会主席:独创性声明。/f㈣嬲本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所

2、做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:邀皇丛签字日期:卫[鲜』月兰日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(一)丹U舌“一一”一⋯一⋯⋯⋯⋯“一⋯””一”一一⋯⋯””⋯一一”一一6(二)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7(三)结果⋯⋯DOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOQOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯BOOOO⋯⋯⋯⋯⋯19三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯·j⋯⋯⋯⋯2l(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26四、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29大黄素对豚鼠胃窦平滑肌细胞L一型钙通道电流的影响硕士生姓名:指导教师:指导小组:专业名称:法欣欣段志军教授郭慧淑教授

4、内科学摘要目的:胃肠动力学及其疾病的研究是近年迅速发展起来的新兴科学,寻找引起胃肠运动障碍的原因对消化道动力障碍性疾病的治疗具有重要意义。中药方剂大承气汤对胃动力的影响及其参与调节胃动力机制的研究尚少,本文的主要目的即研究其主要有效成分大黄素(Emodin)对豚鼠胃窦平滑肌细胞膜L一型钙通道电流(Ica)的影响,以探讨其调控胃肠动力的机制。方法:采用传统全细胞模式的膜片钳技术,记录正常豚鼠胃窦平滑肌细胞的L-型钙电流,用Ba2+做载流子记录Ba2+电流(1B。),lB。与Ic。电流特性相似,可以用IB。代替lc。进行研究。分别用含Ba2+的PSS(生理盐溶液)、10

5、1aMEmodinPSS的和201.tMEmodinPSS的灌流细胞,观察大黄素对豚鼠胃窦平滑肌细胞IB。电流峰值的影响、对IB。的电流.电压曲线的影响及对IB。的稳态激活和失活特性的影响,记录每组均应完整记录六例以上。结果:在全细胞膜片钳记录模式下,持续用含Ba2+的细胞外液灌流细胞,将细胞膜电位钳制在.80mV,给予时程为400ms,从.80mV直接阶跃到0mV的单一去极化脉冲刺激,且这个脉冲刺激每隔10s重复一次。实验中记录到多条单一Ic。待电流稳定后在细胞外液中加入不同浓度的Emodin。以加药前的电流作为对照的结果显示,不论是加入10I.tMEmodin还

6、是20}tMEmodin,lB。都可以被显著激活,表现为lB。电流峰值明显增大,而且这种激活作用呈现时间依赖性。实验结果显示,不同浓度Emodin对IB。的影响是具有电压依赖性的。在细胞外液中加入101aMEmodin后,在膜电位.10mV--,+30mV的电压范围内均可以明显的激活IB。电流(奉P

7、。通道的激活阈值都没有显著影响。将细胞膜电位钳制在.80mV,采用时程400ms,从.60mV~+60mV,步阶电位为10mV的去极化脉冲刺激,即可得到一系列对应于不同膜电位的电流值。使用Boltzmann方程I/Imax=1/{l+exp[(VmV。l/2)/K】)对得到的不同膜电位下的电流比值进行曲线拟合,得到给药前后的稳态激活曲线。其中V。1,2为半数最大激活电压,1c为斜坡因子。统计分析发现10llMEmodin加入前后,半数激活电压Vait2从.12.914-0.61mV变为.12.694-0.50mV(n=10,P>0.05),斜坡因子K为6.614

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