吡格列酮对严重汤伤小鼠创面组织中NFκB和TNFα表达的影响

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1、分类号：R644密级：学位类别：科学学位√专业学位口O学校代码：10062学号：2010602661学科门类：医学又肄鲁斜袁辱硕士学位论文MLASTER’SDISSERTATION论文题目：吡格列酮对严重烫伤小鼠创面组织中肿KB和TNF—Q表达的影响TITLE-EffectsofPioglitazoneonexpressionofNF-KBandTNF-ainthewoundtissueofseverelyburnedmice一级学科：临床医学二级学科：外科学烧伤论文作者：陈宗南指导教师：张明谏教授天津医科大学研究生院二。一三年五月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论

2、文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：熵婿P啐甬7自学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密口，在——年解密后适用本授权书。本论文属于不

3、保密匪Z(请在相对应的方框内打“√”)学位论文作者签名：导师签名：期如l烊珀‘扫期：沙l埠踊r旧目的中文摘要探讨吡格列酮对严重烫伤小鼠创面组织愈合过程中TNF．Ot和NF．r,B的表达影响。1．建立30％全身体表面积(TBSA)HI。烫伤小鼠模型选择健康SPF级ICR小鼠130只(天津医科大学实验动物中心提供)，雌雄各半，体质量29-32g，鼠龄6~8周。小鼠背部按30％TBSA用4％Na2S试剂退毛，腹腔注射4％水合氯醛(40mg·kg-1)麻醉，麻醉成功后将小鼠背部置于100℃热水中烫12S，制成烫伤面积为30％的IⅡo烫伤模型(病理切片证实，正常组不烫伤)，烫伤后立即

4、腹腔注射乳酸钠林格液(40mg·kg。1)复苏。2．实验动物的分组随机分成4组，正常组10只，对照组(I)、实验II组、实验ⅡI组各40只。建模成功后于每日晨8时I组予以0．5mL·d。1生理盐水灌胃，II、ⅡI组分别予以10mg-kg-1·d～、40mg·kg-1·d‘1吡格列酮灌胃(根据预实验和参考文献确定2个剂量)。吡格列酮每日晨8时灌胃一次，连续2周。3．观察指标(1)空腹血糖(FBG)实验动物禁食过夜，于晨8时断头迅速取血。正常组10只一次性处死，I、II、Ⅲ组分别于1、3、7、14d各处死10只。各组处死小鼠时用一次性血糖试纸和血糖仪即时测量FBG。(2)空腹胰

5、岛素(Fins)丕星匿型丕堂亟主堂笪迨竖各组分别于1、3、7、14d各处死10只小鼠时(正常组10只一次性处死)，收集血液标本2mL于3000r／min、30min、4℃离心。收集血清0．5mL于．80℃保存，用于空腹胰岛素测定。实验结束时，将制备好的0．5mL血清置于样品杯中，放置于全自动化学发光免疫分析仪上(运用化学发光免疫法测量Fins的含量)，调整好检测参数后开始检测，读取光量子数，根据标准曲线计算出Fins含量。(3)计算m值利用稳态模式法(HOMA)计算IR值：胰岛素抵抗指数(HOMA．IR)=FBG(mmol／L)XFIns(mIU／L)／22．5。(4)创面

6、组织中TNF．a和NF．10B的表达将创面组织标本常规石蜡包埋，厚度5岬连续切片。常规脱蜡至水后，免疫组织化学染色(SABC法)检测TNF—a和NF．r．B的表达。免疫组织化学染色(DAB显色)结果：阳性呈棕黄色颗粒(主要在细胞浆和／或细胞核中表达)。显微镜下观察并截图：运用计算机图像处理软件进行分析，分别随机计数每张切片5个无重复高倍视野(×400)，测定平均灰度值，以灰度值表示TNF一Ⅱ和NF．r．B的表达情况。4．统计方法采用SPSSl8．0进行数据的统计和处理。数据均以工+s表示，资料采用单因素方差分析(ANOVA)，若有统计学差异采用LSD．t检验，以P

7、为差异有统计学意义。结果1．各组小鼠空腹血糖(FBG)的测定各组处死小鼠时用一次性血糖试纸和血糖仪即时测量FBG，检测结果显示I、II、IⅡ组FBG与正常组比较具有明显差异(P<0．05)。2．各组小鼠空腹血清胰岛素(Fins)的测定II丕洼匡型盔堂亟±堂垡迨竖运用化学发光免疫法测量Fins的含量，I、II、III组Fins与正常组比较具有明显差异(P(O．05)。3．各组小鼠胰岛素抵抗(IR)同一时相点I、II、m组HOMA．IR值两两比较均存在显著性差异(．P