短暂性全脑缺血后海马CA1区细胞骨架的相关变化

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1、分类号：R322.81单位代码：10183研究生学号：2015712020密级：公开吉林大学硕士学位论文(学术学位)短暂性全脑缺血后海马CA1区细胞骨架的相关变化ThechangesofcytoskeletonsintheCA1subfieldofrathippocampusaftertransientglobalischemia作者姓名：郭春艳专业：人体解剖与组织胚胎学研究方向：神经元死亡的肌动蛋白骨架重构指导教师：李艳超教授培养单位：基础医学院2018年4月短暂性全脑缺血后海马CA1区细胞骨架的相

2、关变化ThechangesofcytoskeletonsintheCA1subfieldofrathippocampusaftertransientglobalischemia作者姓名：郭春艳专业名称：人体解剖与组织胚胎学指导教师：李艳超教授学位类别：医学硕士答辩日期：年月日未经本论文作者的书面授权，依法收存和保管本论文书面版本、电子版本的任何单位和个人，均不得对本论文的全部或部分内容进行任何形式的复制、修改、发行、出租、改编等有碍作者著作权的商业性使用(但纯学术性使用不在此限)。否则，应承担侵权的法

3、律责任。吉林大学硕士学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交学位论文，是本人在指导教师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》投稿声明研究生院：本人同意《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》出版章程的内容，愿意将本人的学位论文委托研究生院向中国学术期刊

4、(光盘版)电子杂志社的《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》投稿，希望《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》给予出版，并同意在《中国博硕士学位论文评价数据库》和CNKI系列数据库中使用，同意按章程规定享受相关权益。论文级别：■硕士□博士学科专业：人体解剖与组织胚胎学论文题目：短暂性全脑缺血后海马CA1区细胞骨架的相关变化作者签名：指导教师签名：年月日作者联系地址(邮编)：作者联系电话：中文摘要短暂性全脑缺血后海马CA1区细胞骨架的相关变化目的：脑缺血损伤是一种由多因素引起的神经疾病，常常会导致认知和记忆障

5、碍，至今尚无有效的疗法。脑缺血会引起海马神经元死亡和细胞骨架系统异常。到目前为止，脑缺血后细胞骨架在神经元死亡进程中的具体变化仍不清楚。微管和肌动蛋白纤维(F-actin)是两种重要的细胞骨架，在神经元生长发育过程中扮演着重要的角色。本课题采用短暂性四动脉全脑缺血模型，检测微管和肌动蛋白纤维在缺血再灌注不同时间点的形态学变化，同时检测微管和肌动蛋白纤维相关调节蛋白的表达情况，从而探讨缺血再灌注之后微管和肌动蛋白纤维在神经元延迟性死亡进程中的变化规律。方法：本实验采用短暂性四动脉全脑缺血13min再灌注

6、模型，通过NeuN染色和F-JB染色检测神经元损伤情况，应用鬼笔环肽特异性检测海马中F-actin的变化，应用MAP2和β-Tubulin检测海马中微管的变化；应用westernblot技术检测全海马中cofilin、p-cofilin、β-Tubulin以及acetylatedαTubulin蛋白的表达情况。在此基础上通过体外实验直接检测微管和肌动蛋白纤维的形态学变化，从整体上探讨缺血再灌注后微管和F-actin在海马神经元延迟性死亡进程中的变化规律。结果：1、NeuN、F-JB以及MAP2免疫荧光

7、染色结果显示：海马CA1区锥体神经元在缺血再灌注第2天死亡，随着时间的延长逐渐加重，在缺血再灌注第7天神经元死亡数量达到最大。2、鬼笔环肽检测技术揭示F-actin降解进程与海马神经元死亡进程一致。海马CA1区F-actin在缺血再灌注第2天明显损伤；在缺血再灌注第3天到第7天，F-actin损伤逐渐加重。此外在缺血再灌注第2天到第3天，海马CA1区辐射层中的F-actin典型的点状结构消失。3、Westernblot检测cofilin和p-cofilin蛋白表达情况，结果显示：cofilin的表达水

8、平在缺血再灌注第3天和第7天逐渐增高，然而p-cofilin的表达水平却逐渐降低。I4、β-Tubulin的免疫荧光染色结果显示：与假手术组相比，海马CA1区辐射层中β-Tubulin的表达在缺血再灌注第1天轻微下降，第2天显著降低，之后进行性减少并消失。5、Westernblot检测β-Tubulin和acetylatedαTubulin蛋白表达情况，结果显示：与假手术组相比，缺血组全海马中β-Tubulin的蛋白表达水平变化并不显著，但是acetyl