全脑缺血-再灌注对海马ca1区gad65表达的影响及意义

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1、全脑缺血-再灌注对海马CA1区GAD65表达的影响及意义作者：许林峰，马文裴，刘静，冯忠堂【摘要】目的探讨全脑缺血-再灌注对成年大鼠海马CA1区GAD65表达的影响及意义。方法成年雄性SD大鼠24只，随机分为3组：假手术组（SH）、缺血-再灌注3天组（IR-3）及缺血-再灌注7天组（IR-7），每组8只。采用四动脉阻断法制作全脑缺血-再灌注模型，应用免疫组织化学方法检测海马CA1区谷氨酸脱羧酶（glutamicaciddecarboxylase，GAD）同工酶GAD65的表达变化。结果与假手术组相比，IR-3组GAD65的表达明显

2、增多，IR-7组恢复正常。结论GABA能中间神经元对缺血相对耐受；全脑缺血-再灌注3天，GAD65的表达增多可能是一种代偿性的机制，以减轻脑缺血后的高兴奋性。【关键词】脑缺血；再灌注；谷氨酸脱羧酶；海马；大鼠［Abstract］ObjectiveToobservetheeffectofcerebralischemia-reperfusionontheexpressionofGAD65inthehippocampalCA1regionofadultrats.Methods24maleSDratswererandomlydivided

3、intothreegroups:shamoperationgroup（SH，n=8），ischemia-reperfusion3days（IR-3，n=8）and7daysgroup8（IR-7，n=8）。cerebralischemicepisodewasachievedby4-arteryocclusion．ImmunohistochemicalmethodwasappliedtoobservetheexpressionofGAD65inhippocampalCA1region.ResultsAtIR-3，theimmunor

4、eactivitiesoftheGAD65weremarkedlyelevatedintheCA1region，comparedwithSHgroup.AtIR-7，theirimmunoreactivitiesrecoveredatthemallevel.ConclusionGABAinterneuronsrelativelyresistischemia-reperfusioninjury，andtheincreasingexpressionofGAD65in3dafterischemia-reperfusioncanbeaco

5、mpensatorymechanismtoreducethehyperexcitabilityassociatedwithischemia-reperfusion.［Keywords］brainischemia;reperfusion;glutamatedecarboxylase;hippocampus;ratγ-氨基丁酸（γ-AminobutyricAcid，GABA）是哺乳类动物中枢神经系统中最重要的一种抑制性氨基酸（inhibitoryaminoacid，IAA）递质［1］，GABA能的抑制作用在调控谷氨酸能突触的活动中起着

6、重要的作用。因此，GABA能系统的异常可以导致神经元的高兴奋性，从而导致再灌注损伤。因而研究脑缺血后GABA功能的变化，对脑缺血的治疗有重要的指导意义。本研究通过建立全脑缺血-再灌注动物模型，探讨成年大鼠海马CA1区GAD65的表达变化及意义。81材料与方法11实验动物及分组24只雄性SD大鼠，体重200~250g（昆明医学院实验动物中心提供），随机分为3组：假手术组（SH）、缺血再灌注3天组（IR-3）和缺血再灌注7天组（IR-7）各8只。12全脑缺血-再灌注模型制备采用四血管阻断法制作全脑缺血（10min）-再灌注动物模型

7、。以04%戊巴比妥钠（40mg／kg）腹腔注射麻醉后，从后颈部正中纵向切开皮肤，分离椎旁肌，暴露第一颈椎翼状孔，电灼烧凝固双侧椎动脉，造成永久性关闭。再从颈前正中纵向切开皮肤，分离双侧颈总动脉，分别用丝线绕过双侧颈总动脉，将丝线的另一端置于皮肤切口外，不完全缝合皮肤切口以备次日用。24h后用留置丝线将双侧颈总动脉由皮肤切口牵出，用动脉夹夹闭双侧颈总动脉10min后再通。术中及术后保持肛温37℃。模型成功标准：1min内昏迷，双侧瞳孔放大，翻正反射消失。假手术组仅暴露双侧颈总动脉和翼小孔，不做缺血处理。采用四血管阻断法，制作大鼠全

8、脑缺血（10min）再灌注模型。模型成功标准：（1）翻正反射消失；（2）呼吸加快，竖毛，眼发白。术中及术后保持肛温37℃。13标本取材及制作脑组织切片假手术组在再灌注后24h，实验组在再灌注后相应时间点经04%戊巴比妥钠（40mg／kg）腹腔注