电针预处理对小鼠全脑缺血再灌注ampk表达的影响

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1、分类号：R614密级：不保密UDC：610学校代码：11065硕士学位论文电针预处理对小鼠全脑缺血再灌注AMPK表达的影响冉强强指导教师王明山教授学科专业名称麻醉学论文提交日期2015年3月20日论文答辩日期2015年6月6日答辩委员会主席于金贵教授电针预处理对小鼠全脑缺血再灌注AMPK表达的影响摘要目的：探讨电针预处理对短暂性全脑缺血再灌注小鼠海马CA1区单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMP-activatedproteinkinase，AMPK)表达以及神经细胞凋亡的影响。方法：9周健康雄性C57B

2、L/6小鼠60只，体重20-25g，通过随机数字表法，将其随机分为5组(n=12)：假手术组(Sham)、脑缺血再灌注组(BCCAO组)、电针预处理组(EA+BCCAO组)、AMPK抑制剂CompoundC组(CC+BCCAO组)、电针预处理联合CompoundC组(EA+CC+BCCAO组)。采用双侧颈总动脉结扎法(BCCAO)建立全脑缺血模型15min。再灌注72h时后断头取脑，随机分为2组(n=6)：6只小鼠取海马组织，HE染色和TUNEL法观察海马CA1区神经细胞形态变化及凋亡神经细胞计数；

3、6只小鼠取海马组织，Western-blot法检测AMPKα及磷酸化AMPKα(p-AMPKα)的表达。结果：与BCCAO组相比，EA+BCCAO组凋亡神经细胞计数明显减少，AMPKα表达升高(P＜0.05)；与EA+CC+BCCAO组比较，EA+BCCAO组凋亡神经细胞计数降低，p-AMPKα表达升高(P＜0.05)。结论：电针预处理通过上调小鼠短暂性全脑缺血再灌注时海马AMPKα及p-AMPKα蛋白的表达，从而减少神经细胞凋亡，产生脑保护作用。硕士研究生:冉强强(麻醉学)指导导师:王明山教授关键

4、词：电针预处理；AMPK；脑保护；脑缺血再灌注EffectofelectroacupuncturepreconditioningonexpressionofAMPKinhippocampusfollowingtransientcerebralischemia-reperfusioninmiceAbstractObjective:ToinvestigatetheeffectofelectroacupuncturepreconditioningonexpressionofAMPKandapoptosis

5、ofneurocytesinhippocampusofmicefollowingtransientcerebralischemia-reperfusion.Methods:SixtyhealthymaleC57BL/6micewererandomlyassignedinto5groups:groupSham,BCCAO,EA+BCCAO,CC+BCCAOandEA+CC+BCCAO.Shamgrouponlysubjectedtocervicalmedianincisionservedasblank

6、controlandBCCAOgroupunderwent15minutesbilateralcommoncarotidarteryocclusion(BCCAO)withoutanyothertreatment.EA+BCCAOgroupwascontinuouslyadministeredelectroacupuncturepreconditioningbeforeBCCAOandCC+BCCAOgroupwasgivenCompoundC(AMPKinhibitor)beforeBCCAO.E

7、A+CC+BCCAOgroupwascontinuouslyadministeredelectroacupuncturepreconditioningandthengivenCompoundCbeforeBCCAO.Seventy-twohoursafterreperfusion,allmicewereharvestedandtheexpressionlevelofAMPKandp-AMPKαinbrainwasinvestigatedbyWesternblot.Themorphologicalal

8、terationandnumberofneurocytessurvivinginhippocampusCA1wasmeasuredbyHEstainingandTUNEL.Results:IncontrastwithBCCAOgroup,theproportionofapoptosisneurocytesinEA+BCCAOgroupdecreasedsignificantlyandtheexpressionofAMPKαincreasedsignificantly(