慢性脑缺血大鼠海马ca1区锥体细胞树突形态学变化及树突棘密度的研究

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1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterChangesinDendriticMorphologyandSpineDensityinHippocampaiCAlPyramidalCellsoftheChronicCerebralIschemiclhtByHeJiaSupervisor：Prof．BoaiZhangNeurologyThefirstaffiliatedhospitalofZhengzhouUniversityMay20

2、11r原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：嘧镊日期：力胁年岁月Ig日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论

3、文被查阅和借阅；本人授权郑州，大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：＼晚旅日期：力胁年厂月／罗日摘要慢性脑缺血大鼠海马CAl区锥体细胞树突形态学变化及树突棘密度的研究研究生：贾贺导师：张博爱教授郑州大学第一附属医院神经内一科河南郑州450052目的和背景慢性脑缺血是一种比较常见的病理状态

4、，多伴发于脑动脉硬化、Alzheimer病、血管性痴呆、动静脉畸形和Binswanger病等多种脑血管疾病的病理过程中，临床上以进展性认知功能损伤及神经功能障碍为主要表现。海马是大脑边缘系统的一个重要的组成部分，参与许多高级神经活动、行为反射、内脏活动、调节生物节律及内分泌等机能的整合作用，并主要与学习、记忆功能有着密切的关系111，尤其是海马CAl区锥体细胞承载着信息的强化、加工和传递功能。由于海马区血管构筑的独特性及细胞高度有序的板层构筑等原因，使其成为脑内对缺血、缺氧最敏感的区域【2J。树突是神经

5、元胞体延伸出来多个细长呈放射状的突起，是信息接收的重要区域，具有整合突触传递的功能。树突表面有众多内含肌动蛋白的小突起，称树突棘，其作为大部分兴奋性突触的后膜，是突触形成的具体位点。树突的分支、伸展长度及树突棘的数目均可扩大神经细胞接受刺激的表面积，在神经元信息传递、加工和整合过程中起着至关重要的作用。因此，海马锥体细胞树突的形态及树突棘结构的可塑性被认为是学习和记忆的细胞基础。既往众多研究表明急性脑缺血可导致海马CAl区锥体细胞的一系列损伤性改变，造成树突及树突棘不同程度的损伤，但慢性脑缺血中是否存在

6、同样的损伤性变化，其损害程度及其随时间的变化关系等仍不十分清楚。本实验通过对摘要SD大鼠进行永久性双侧颈总动脉结扎(two。vesselocclusion，2VO)13】【4】，建立慢性脑缺血模型，经快速灌注Golgi染色，光镜下观察大鼠海马CAl区树突形态及树突棘密度的变化，探讨慢性脑缺血对海马CAl区损伤的细胞机制及其对学习记忆功能的影响。材料和方法健康SD大鼠30只，雌雄不限，6月龄，体重320．3509，随机分为模型组和假手术组，每组15只。每组又分为2周、4周、8周三个时间点进行观察。对模型组

7、大鼠进行双侧颈总动脉永久性结扎以制备慢性脑缺血模型。分别于2周，4周，8周通过Morris水迷宫实验对各组大鼠进行行为学评价，并筛选造模成功大鼠。水迷宫实验后对模型组及假手术组大鼠行断头取脑，分别进行Golgi染色，并在光镜下观察海马CAl区锥体细胞树突的分支、长度及树突棘密度变化。结果1．行为学评价结果：与假手术组相比，模型组大鼠2周即出现逃避潜伏期显著延长(P<0．05)，穿越平台数显著减少(P<0．01)，此变化趋势持续到8周，并于8周表现更加显著，提示模型组大鼠学习记忆功能受损，出现一定的认知功

8、能障碍。模型组大鼠随着缺血时间延长，认知功能障碍显著性加重。2．树突分支、长度及棘密度的结果：与假手术组相比，4周、8周模型组树突的分支及长度显著减少(P