全脑缺血损伤大鼠大脑海马CA1区神经细胞的死亡机制研究-论文.pdf

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1、重庆医科大学学报2014年第39卷第2期(JournalofChongqingMedicalUniversity2014．VOI．39No．2)一161一晦DOI：10．13406／j．cnki．cyxb．2014．02．007全脑缺血损伤大鼠大脑海马CA1区神经细胞的死亡机制研究季红超，包翠芬z，刘玉玲z，邵佑之z，刘霞(辽宁医学院1．组织胚胎学教研室；2．科学实验中心，锦州121001)【摘要】目的：探讨全脑缺血损伤时大鼠大脑海马CA1区神经细胞的死亡机制。方法：采用双侧颈总动脉夹闭的方法制作大鼠全脑缺血模型，成功制造模型后分别于缺血0、5、10、15、20、25、30min进行取材。采

2、用q'TC染色和脑组织含水量进行模型鉴定；采用光学、电子显微镜技术观察全脑缺血大鼠的大脑海马CA1区的形态学变化：分别采用免疫组化和免疫印迹方法检测大鼠大脑海马CA1区的多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶一1(polyadenosinediphosphateribosepolymerase一1，PARP一1)和半胱氨酸蛋白酶一3(Caspase一3)蛋白的表达情况。结果：PARP一1阳性表达定位于海马CA1区神经细胞核，Caspase一3阳性表达定位于细胞质。PARP一1的免疫印迹在缺血0min组大脑海马CA1区呈微弱表达(O．0233±0．0351)，而5rain时PARP一1的表达增强(O．710

3、0-i-0．1127)，至15min时呈高表达(1．0633±0．0907)，持续至30min(1．49004-0．1833)，且与0min组比较差异有统计学意义(0．000)。而缺血0rnin时大脑海马CA1区Caspase一3则呈阴性表达，于缺血5min时可见阳性表达(0．08004-0．0200)，持续至30min(0．27004-0．0529)，且与0rain组比较差异有统计学意义(0．006)。结论：细胞胀亡参与了全脑缺血性损伤大鼠海马CAI区神经细胞死亡，其原因是由PARP一1的过度激活所导致。【关键词】全脑缺血；海马；胀亡；凋亡；多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶一1；半胱氨酸蛋白酶一3

4、【中图分类号】R743．9【文献标志码】A【收稿日期】2013—01—09CelldeathmechanisminhippocampalCA1regionofratwithglobaIcerebralischemicinjuryjiHongchad,BaoCuifen2,LiuYulinf，ShaoYouzhi2,LiuXia(．TeachingandResearchSectionofHistologyandEmbryology；2．ScientifcLaboratoryCentral，LiaoningMedicalUniversity)【Abstract]Objective：Toexplo

5、rethecelldeathmechanisminhippoeampalCA1regionofratswithglobalcerebralischemicinjury．Methods：Globalcerebralischemiamodelwasestablishedusingbilateralcarotidarteryocclusionmethodandsampleswereacquiredat0，5，10，15，20，25，30minrespectivelyaftermodelestablishment．ModelidentificationwasmadebyqTCstainingandb

6、rainwa—tercontentdetection．MorphologicalchangesinhippocampalCA1regionofratswithglobalcerebralischemicinjurywereobservedbyopticalandelectronmicroscopy．Immunostochemistryandimmunoblottingwereusedtodetecttheproteinexpressionofpolyadeno—sinediphosphateribosepolymerase-1(PARP-1)andCaspase-3inhippocampal

7、CA1regionofrats．Results：PositiveexpressionofPARP——1waslocatedinnervenucleusinhippocampalCA1regionandpositiveexpressionofCaspase—_3waslocatedinthecyto——plasm．PARP一1expressedmildlyinhippocampalCA1regionat0min