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1、脑室内注射胰岛素对大鼠全脑缺血后海马CA1区Bcl论文李兵，章翔，蒋小帆，王彦刚，张戈【关键词】胰岛素；脑缺血；Bcl摘要：目的观察胰岛素对全脑缺血后海马CA1区Bcl2mRNA含量变化及其蛋白表达的影响，探讨胰岛素保护作用的机制。方法利用4VO法制作大鼠全脑缺血模型。造成脑缺血15min后行再灌注，治疗组于再灌注后即刻经脑室注入1u胰岛素(10μL，1×105u/L).freelRNA相对含量的变化。结果全脑缺血后1、3、5d治疗组海马CA1区可见呈阳性表达的Bcl2蛋白，而缺血组海马CA1区
2、Bcl2蛋白的表达则呈阴性；gCl2，1μL各引物(pmol/μL)，0.5μLTaqDNA聚合酶(5u/μL)。使用PTC100PCR仪进行热循环。循环条件：93℃1min，56℃30s，72℃1min，进行一个循环；93℃1min，56℃30s，72℃1min，进行32个循环；72℃延伸8min。取扩增产物10μL，经30g/L琼脂糖凝胶电泳、溴化乙锭染色后，用凝胶成像系统进行检测，用Labin；冲洗后滴加3%(体积分数)H2O2阻断内源性酶15min，冲洗5min；滴加Bcl2抗体(Sta
3、ntaCruz，1∶1000)50μL，4℃孵育过夜，PBS冲洗，参照SABC试剂盒说明(博士德公司)分别滴加二抗及StreptavidinPeroxidase，DABH2O2混合液显色，封片，镜下观察。1.7gCl20.5mL，D.,XieZ,DeverauxQ,etal.BaxdirectlyinducesreleaseofcytochromecfromisolatedmitochondriaJ.ProcNatlAcadSciUSA,1998,95:49975002.6NaritaM,Shi
4、mizuS,ItoT,etal.BaxinteractseabilitytransitionporetoinducepermeabilitytransitionandcytochromecreleaseinisolatedmitochondriaJ.ProcNatlAcadSciUSA,1998,95:1468114686.7LiP,NijhaecanddATPdependentformationofApaf1/caspase9plexinitiatesanapoptoticproteaseca
5、scadeJ.Cell,1997,91:479489.8ThornberryNA,LazebnikY.Caspases:enemies,GhenJ.ProgrammedcelldeathincerebralischemiaJ.JCerebBloodFloidalcelllayerofthegerbilhippocampusfolloiaisapoptosisJ.JNeurosci,1995,15:10011011.11蒋杞英,王志新,符风英.大鼠局灶性脑缺血再灌注脑组织神经细胞凋亡与Bcl2、B
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