刺五加多糖对人小细胞肺癌H446细胞的抑制作用及免疫调节作用研究

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1、英丈缩写英文缩写SCLCsmallcelllungcancer小细胞肺癌ⅧRmultidrugresistance多药耐药ASPSAcathopanassenticosuspolysacharides刺五加多糖APSAstragaluspolysaccharides黄芪多糖GLPGanodermalucidumpolysaccharides灵芝多糖PNPPholiotanamekoPolysacharides滑菇多糖Ⅳ【TT3一(4，5一dimethylthiazol一2一y1)一2，5四甲基偶氮唑蓝一diphenyltetrazoliumbro

2、mideFCMflowcytometry流式细胞术DMSOdimethylsulfoxide二甲基亚砜ERKextracellularregulatedproteinkinases细胞外调节蛋白激酶Rr-PCRReversetranscriptionpolymerasechain反转录聚合酶链reaction式反应17河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要

3、内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生签名：燃导师签名：仍勃学院领导签名：孙澎舀溯年9月彩日．研究生学位论文独创洼声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。>，力D研究生签名：夫媛导师签名：／沙多(，{移—办。了年≯月留日中文摘要剌五加多糖对人小细胞肺癌H446细胞的抑制作用及免疫调节作用研究摘要目的：

4、最近几十年，来源于高等植物、藻类、地衣及大型真菌的植物多糖，因其广谱治病性、低毒且副作用小的特点已经引起生物医学界极大的关注。植物多糖已经成为理想的免疫调节和抗肿瘤新药的候选。从众多的植物多糖中筛选出抗肿瘤和免疫调节作用好的多糖是目前医药学界重要的任务之一。刺五加似canthopanaxsenticosusHarms)，又名五加参、刺拐棒，属于五加科，是一种珍贵药用植物，作为一种传统的中药，很久以前就用于治疗许多种疾病，如脑血管病、糖尿病、肿瘤、心血管病、高血压、风湿性关节炎等，也用于减缓压力和疲劳。刺五加中含有多种有效成分如甙类、苷类、三萜类、

5、黄酮、多糖、维生素和矿质元素等，这些成分有不同的生物学活性。刺五加多糖(AcathopanassenticosusPolysacharides，ASPS)是从刺五加的根及茎皮中提取出的生物活性多糖，具有提高免疫力、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、降血糖和降血脂、抗衰老等作用。实验证明ASPS可以增加淋巴细胞的增殖、促进巨噬细胞的吞噬。可以显著抑。t}jt．ullSl80的生长、延长荷瘤鼠的存活时间，但是对其抗肿痛、免疫调节作用的机制还不清楚。本研究首先用ASPS与经过实验证明具有抗肿瘤作用和免疫调节作用的植物多糖，即来自高等植物的黄芪多糖(Astragal

6、uspolysaccharides，APS)来自大型真菌的灵芝多糖(Ganodermalucidumpolysaccharides，GLP)和滑菇多糖(Pholiotanamekopolysacharides，PNP)，通过MTT法等，对白血病细胞株K562的抑制作用及对小鼠体外脾淋巴细胞转化作用进行比较研究。在此基础上选取了不同来源的肿瘤细胞株1i[JK562、H446、SMMC．7721、BGC、HeLa细胞株，选出ASPS抑制作用最强的细胞株。然后采用MTT、流式细胞技术、Hoechst33258染色、WestemEl丁迹、免疫荧光细胞化学

7、方法、RT-PCR等方法进一步从细胞水平、分子水平研究ASPS对肿瘤细胞凋亡及其相关基因表达的影响，对细胞周期阻滞及相关的细胞中文摘要信号通路的影响，对腹腔巨噬细胞的体外激活作用及细胞因子产生的影响。为ASPS的开发利用提供理论基础。材料与方法：1．四种植物多糖的抗肿瘤及免疫调节作用比较四种植物多糖由河北师范大学生命科学学院生化与分子生物学实验室提供。BALB／c小鼠由河北医科大学动物中心提供。1．1细胞培养K562、H446、SMMC．7721、BGC、HeLa细胞采用含有10％新生牛血清、青霉素100u／mL、链霉素100rtg／mL的RPM

8、I．1640培养基。置于37℃，5％C02，饱和湿度环境下培养。1．2MTT检测抑制率取对数生长期的细胞，以1x105／mL细胞浓度接种