皮肤分支杆菌感染快速诊断方法的研究及其在临床中的应用

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1、中国协和医科大学博士学位论．支缩略语nontuberculousmycobacteriaacid．fastbacilliacquiredimmunodeficiencysyndromehumanimmtmodeficiencyvirusheatshockprotein65insertionsequencepolymerasechainreactionrestrictionfragmentpolymorphismanalysisthin·layerchromatographygas-liquidchromatographyhi

2、gh-performanceliquidchromatographyrotateperminutekilodaltonweekdayhourminutesecondbasepaireppendorfethidiumbromidebacilleCalmette．Gu6rin非结核分支杆菌抗酸杆菌艾滋病人类免疫缺陷病毒热休克蛋白插入序列聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析薄层色谱法气相色谱法高压液相色谱法壤

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4、々研究及其在l临床中的应用翮’看分支杆菌(Mycobacterium)属于放线菌(Actinomycete)家族，是一类重要的人类和动物致病菌，主要包括结核杆菌(Mycobacteriumm6a℃幽s捃)、麻风杆菌(MycobacfPriumleprae)和非结核分支杆菌(nontuberculousmycobacteria，NTM)【l】。人类分支杆菌的感染可以追溯到史前时期。根据古生物病理学的资料，公元前3700年在古埃及就发现了结核杆菌感染的证据，在早期的《圣经》上对麻风杆菌的感染也有所提及12]。1826年Laenn

5、ec在尸体解剖室内感染了皮肤结核，他形象地将之描述为“解剖员疣(prospector’swart)”，这是人类对皮肤结核的最早记载。1873年Hansen发现了麻风分支杆菌。1882年Koch发现了结核杆菌‘”。虽然此后不久NTM就被发现，但是直到20世纪50年代才正确地评价了它们对于人类的致病性H。在过去的几十年间，由于卫生条件的改善，生活水平的提高，卡介苗(BCG)的预防接种以及有效的抗结核化疗药物的应用，结核患者的数量曾一度下降。二十世纪80年代以来，随着HIV的流行、其它免疫功能缺陷如恶性肿瘤、长期应用皮质类固醇激素

6、或免疫抑制药物等患者的增多，以及对结核的预防和控制警惕性的放松，造成了结核的再度复燃，在发展中国家尤为明显。据统计，目前全世界人口中约有l／3感染结核杆菌，每年的新发病例就达800万，而死亡病例达300万之多。结核杆菌也是HIV感染者最常见的机会致病菌”5】。麻风仍然是一个尚未完全解决的棘手问题。据估计目前全世界仍有60万麻风患者，其中许多人尚未得到治疗；在亚、非、拉美和太平洋地区麻风仍在流行，约有25％的麻风患者会遗留生理残疾，因此麻风是一种可引起严重的经济和社会问题的感染性疾病吼非结核分支杆菌感染的地位也越来越重要。NT

7、M广泛存在于水、土壤、灰尘、未消毒的牛奶、动物和植物上，所以又称之为环境分支杆菌(environmentalmycobacteria)。与结核杆菌一样，NTM不仅可以引起肺感染，还可以引起局部皮肤和软组织的感染，严重时甚至发生全身播散性感染【61。HIV感染者也容易受到NTM感染，其中绝大多数(>95％)为鸟分支杆菌感染，播散性鸟分支杆菌感染是艾滋病(AIDS)患者最常见的细菌感染，有人报道感染率可达20％～40％。AIDS患者伴发其它NTM如堪萨斯、瘰疬、戈登、嗜血、蟾蜍、偶然、龟以及海分支杆菌等的感染也已有报道睁⋯。其它

8、原因引起的免疫抑制或免疫功能正常的宿主也可发生NTM感染。皮肤NTM感染l

9、盆床表现多种多样，可为丘疹、斑块、脓疱、化脓或不化脓的结节、溃疡或孢子丝菌病样皮疹等，缺乏特异性，难以与其它细菌或真菌感染相鉴别嗍；同样，在组织病理上也难以发现象皮肤结核那样特征性的结构，这些都给诊断造成了极大的困难，因此』临床上这类疾病的误诊和漏诊率较高，是皮肤病学家亟待解决的一个难题。皮肤分支杆菌感染的确切诊断常需要查到致病菌。常规方法主要有直接镜检和分支杆菌培养。直接镜检就是将分泌物或组织匀浆直接涂片，检查抗酸杆菌，虽然方法简单、快速，但阳性率

10、低，而且不能确定致病菌种；分支杆菌的分离培养阳性率较高，但所需时间长，一般需要l～2个月才能判断结果为阴性或阳性；如果培养出分支杆菌，还需要鉴定致病菌种，因为不同菌种的分支杆菌对药物的敏感性不同，所以将培养的致病菌株鉴定至种的水平有助于临床上选择合适的治疗方案。传统的分支杆菌的鉴定方法主要