委陵菜多糖的提取分离及生物学活性研究

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1、937280分类号UDC甘肃农业史学密缓——单位代码!!婴学位论文委陵菜多糖的提取分离及生物学活性研究ExtractionandBiologicActivitiesStudyofPotentillaAnserlinePolysaccharide郑立颖指导教师姓名盟塑墼量!笪壹壅些盘堂塾塑匿堂堕兰型!垒业!Q!塑鏖焦壁塞璺!兰型查墼董蔓互壁基旦兰型翌!!!!!学科专业名称!童鏖壹匿耋申请学位级别——亟主论文譬辩日期；!!!芏!旦塑垦研究方向兽医中药学与中药免疫论文提交日期2006年4月26日学位授予日期2006年6月16日答辩委员舍主席塑堑笪堑翼星评阅入薹宣堡塑埋

2、垣查堡i￡塞星2006年6月委陵菜多糖的分离提取及生物学活性研究摘要从蔷薇科委陵菜属鹅绒委陵菜(PotentillaanserineL．)的根中提取、分离纯化得到委陵菜多糖(potentiltaarrs'erinepolysaccharide，PAP)，委陵菜多糖主要由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖组成，单糖通过0【-糖苷键连接而成。初步分析了委陵菜多糖的理化性质和组分；采用MTT法评价了委陵菜多糖对体外培养的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响；以外源性NO供体——硝普钠为阳性对照，应用激光共聚焦扫描显微镜技术(confocallaserscanningmicrosco

3、pe，CLSM)年llGriess试剂法分别测定了细胞内c矿浓度变化和细胞分泌NO的能力，观察了委陵菜多糖对体外培养的小鼠免疫细胞(腹腔巨噬细胞、脾淋巴细胞)的信号分子——Ca2十、NO的影晌；应用MTT法检测了委陵菜多糖刺激小鼠脾淋巴细胞分泌白介素．2的变化；以经调理的酵母多糖刺激体外培养的小鼠腹腔中性粒细胞，诱导细胞产生呼吸爆发，分别测定了·OH、02‘·和H202的含量，研究了委陵菜多糖对活性氧及自由基的影响。结果表明：委陵菜多糖结构中不合硫酸基团；委陵菜多糖可促进脾淋巴细胞增殖和分泌IL．2；委陵菜多糖对体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞内Ca”浓度

4、影响呈现相反作用，即降低腹腔巨噬细胞Ca2+浓度，而增加脾淋巴细胞Ca2+浓度；委陵菜多糖对体外培养的脾淋巴细胞分泌NO具有促进作用，对腹腔巨噬细胞分泌NO无显著影响；委陵菜多糖可调节经调理酵母多糖诱导的小鼠腹腔中性粒细胞呼吸爆发，有明显的抗02一，且与委陵菜多糖剂量呈拒相关，但对·OH无明显影响。综上所述，委陵菜多糖通过促进免疫细胞增殖和影响细胞信号分子，从细胞增殖和细胞信号转导两个途径发挥其免疫调节作用，而且通过抗02一·产生实现对机体细胞功能的调控，但两者之I刊的关系有待进一步探讨。关键词：委陵菜多糖(PAP)；Ca2+：NO；硝普钠(SNP)；淋巴细胞；

5、巨噬细胞；腹腔中性粒细胞：呼吸爆发；自由基ExtractionandBiologicActivitiesStudyofPotentillaAnserinePolvsaccharideSummaryExperimentswereperformedtoobservebiologicactivitiesofPotentillaAnserinePolysaccharide(PAP)．Firstofall，PAPwasextractedandisolatedfromtherootofPotentillaanserineL—PAPwasalsopurifiedinterms

6、ofitschemicalcharacterforthenextstudy．PAPiscomposedofglucose，arabinose，galactoseandrhamnoset．Allmonosaccharideconnectedwither—indicanbond．Secondly,thebasicanalysesonthestructuralfeaturesofPAPwerestudiedbyultra—violetabsorptionspectrumandthreechemicalreactions．Finally,theeffectsofPAPo

7、nproliferationandfunctionofcultivatedimmunitycells(1ymphocyte，macrophage)frommousewereobservedthroughsevernimmunologicaltests．TheeffectofPAPODcellsproliferationwasevaluatedbythemethodofMTT．Intheexperimentsonsignaltransduction，sodiumnitropmsside(SNP)wasselectedasapositivecontrolagent．

8、[Ca2+]concen