葛仙米多糖的提取分离、结构和活性研究

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时间:2019-03-08

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1、上海海洋大学硕士学位论文学校代码:10264研究生学号:M150208384上海海洋大学硕士学位论文葛仙米多糖的提取分离、结构和活性题目:研究Studyonextraction,structureandactivity英文题目:ofNostocsphaeroidskützpolysaccharide专业:食品科学与工程研究方向:生物制药姓名:苏攀峰指导教师:许剑锋二O一八年五月二十日上海海洋大学硕士学位论文葛仙米多糖的提取分离、结构和活性研究摘要葛仙米学.名Nostocsphaeroids.kütz,是一种多.细胞丝.状蓝藻,具有明.目、清热、利.肠等多种功效。近

2、年来,随着人工培养技术已趋于完善,葛仙米越来越多地被运用于食品、保健品和化妆品中。多糖是葛.仙米中主.要活性成分,但.对其多糖.含量的测定方.法、结构特征.和生.物活性.还缺.乏研究,因此建立葛仙米多糖的显色法和HPLC测定方法,同时对葛仙米多糖进行分离纯化和结构分析,并探.究葛仙米多糖的.保湿性及免.疫调节作用,主要结果.如下:对苯酚-硫酸法测葛仙米中多糖方法进行优化,葛仙米多糖提取最优工艺条件为:料液比1:.500、温度100℃、提.取时.间6h,采用.苯酚硫.酸法测定多糖.含量为32.65%;方法学.考察显示该方.法加样回.收率好,稳定.性好,精密.度高。用

3、HPLC对葛仙米中多糖进行含量测定,结果发现采用TSK-GelG6000PWXL后,大分子量多糖可以有效分离。标准品.在0.15625~5mg/mL范.围内多糖.含量与峰面.积呈良好的线性.关系;HPLC.测定葛仙米.水提液中多糖.含量的.精密度、重复.性和稳定.性的RSD分别.为1.59%、1.1.3%、2.5.6%,平均.加样回收.率为97.8%、RSD是1.72%,该方法灵敏度高、重复.性和稳定.性.较好,实验结.果可靠,所建.方法适.用于葛仙米中大.分子多.糖含.量的测定。葛仙米通过分级醇沉纯化葛仙米多糖,并通过反复醇沉纯化,获得葛仙米均一多糖NSKP40

4、(40%醇沉)。重均分子量Mw为1.31×105Da,由半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、葡萄糖醛酸组成。对葛仙.米多糖进.行糖醛酸还.原、傅里叶.变换红外吸.收光谱(FTIR)、甲基.化、核磁共.振波谱(NMR)分析,结.果表明,NSKP40(40%醇沉)主要由Terminal-Gal-、Terminal-GlcA-、-4-Man-1→、-4-Xyl-1→、-3,4-Glc-1→、-4,6-Glc-1→六种糖残基构成,其化学结构为:I上海海洋大学硕士学位论文用MCR-302旋转流变仪探讨葛仙米多糖流变学特性发现,葛仙米多糖是典型的假塑性流体,其表观黏度受温度、浓度、

5、pH、盐离子浓度、抗氧化剂、氧化剂的影响。多糖的表观黏度随质量浓度的增大而增加;在20~80℃内,溶液黏度随着温度的升高而降低;pH=7时的溶液黏度最大;VC和H2O2可以降低多糖溶液的黏度,但下降幅度与VC浓度无关;葛仙米多糖的动态黏弹性显示,在扫描频率0.1~10Hz内,储能模量(G´)和损耗模量(G´´)随葛仙米多糖溶液质量浓度的增加而增大。此外,葛仙米多糖与透明质酸具有协效性。葛仙米多.糖在不同.相对湿度(43%和.81%)的条.件下,具有.吸湿保.湿性,且大分子量.葛仙米.多糖的保.湿率优.于透明质酸。与LPS刺激对照组相比,葛仙米多糖可以刺激模型细胞的

6、NO释放量,且多糖在低浓度50μg/mL就表现出一定的免疫活性。因此,葛仙米.多糖可以通.过抑制巨噬.细胞模型.的NO分泌,产.生免疫调节.生物活性。关键词:葛仙米,多糖,提取分离,结构,流变性,保湿性,生物活性II上海海洋大学硕士学位论文Studyonextraction,structureandactivityofNostocsphaeroidskützpolysaccharideABSTRACTNostocsphaeroidskützisakindofblue-greenalgaeoftheChinesemedicineandfood,whichhasthe

7、efficacyofbrighteyes,clearingheatandbenefitbowel.Inrecentyears,withtheartificialcultivationtechnologyhastendedtoperfect,itwasusedinthefood,healthcareproductsandcosmetics.Inrecentyears,withtheartificialcultivationtechnologyhastendedtoperfect,itwasusedinthefood,healthcareproductsandcosm

8、etics

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