hsp90β和enterolactone影响fak调控乳腺癌细胞侵袭转移的实验研究

《hsp90β和enterolactone影响fak调控乳腺癌细胞侵袭转移的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、’分类号：密级：ＵＤＣ：学号：３５Ｗ０５１０８０２０南昌大学博±研究生学位论文ＨＳＰ９０ｇ和ＥｎｔｅｒｏＩａｃｔｏｎｅ影响ＦＡＫ调控乳腺癌细胞侵袭转移的实验硏究ＨｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎｐａｎｄＥｎｔｅｒｏｌａｃｔｏｎｅｉｍｐａｃｔｆｏｃａｌａｄｈｅｓｉｏｎｋｉｎａｓｅａｎｄｒｅｕｌａｔｅｃｅｌｌｍｉｇｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｖａｓｉｏｎｉｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓｇ熊向阳培养单位（院；、系）南昌大学食品学院指导教师姓名；刘成梅指导教师姓名：罗时文申请学位的学科口

2、类：医学学科专业名称：营养与食品卫生学４论文答辩日期：２０１．１２—答辩委员会主席：－￡（２＾评阅人：＾…ｊ韦畫２０１４年１２月学位论文独创性声明学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中持别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大的学位或证书而使用过的材料一堂或其他教育机构。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名ｔ（手写巧Ｖ签字日期：年瓜月Ｉｆ

3、ｆ日学位论文版权使用授权书、本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕±学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向化＂＂会公众提供信息服务，同意按章程规定享受相关权益。学位论文作者签名（

4、手写）：导师签名（手写）；＇签字日期脾月日签字日期：知年／Ｊ［月＾日论文题目ＨＳＰ９０Ｐ和Ｅｎｔｅｒｏｌａｃｔｏｎｅ影响ＦＡＫ调控乳腺癌细胞侵袭转移的实验研究兰名熊向阳学号３５加０引０８０２０论文级别博±７＾硕±＾院／系／所南昌大学食品学院专业营养与食品卫生学Ｅｍａｉｌ备往：／开＂保密＂□保密（向校学位办申请获批准为，年月后公开）？摘要第一部分ＨＳＰ９０ｅ稳定ＦＡＫ调控乳腺癌细胞侵袭转移研究目的：一ＨＳＰ９０是种高度保守的分子伴侣，它通过参与顾客蛋白的折叠、成一种重要的酪氨酸激酶熟与降解过程而调

5、节相关信号转导途径，；作为ＦＡＫ尚未被认为是ＨＳＰ９０的顾客蛋白。本课题通过检测ＨＳＰ９０Ｐ与ＦＡＫ之间是否存在相互作用，Ｗ及它们之间相互作用的化制，寻找与肿瘤发生－ＭＢ－相关的ＨＳＰ９０新的客户蛋白，探讨ＦＡＫ在ＭＤＡ２３１乳腺癌细胞中调节细胞生长、迁移和侵袭的机理，从而提供与ＨＳＰ９０抑制剂相组合的Ｗ及为研发鞭向蛋白质－蛋白质相互作用的抗癌药物提供理论潜在药物，依据。研究方法：－１ｕ、．通过构建质粒Ｐｌｌｄｏｗｎ，采用免疫共沉淀、ＧＳＴ免疫巧光等方法研究ＨＳＰ９０Ｐ和ＦＡＫ的相互作用；－畑反阻断细胞２．利用照Ｐ９０抑制剂１７Ａ

6、ＡＧ处理乳腺癌细胞，利用ＨＳＰ９０对ＦＡＫ稳定性的影响－ＡＡＧ和内蛋白质的合成，观察Ｐ；Ｗ１７－－３２ＭＢ－２３ＭＧ１单独或共同处理ＭＤＡ１细胞，用ＦＡＫ抗体进行免疫共沉淀泛素蛋白，检测ＦＡＫ是否经过泛素／蛋白酶体途径被降解；－ａａｒｒａｎｓｗｅｌ３．組过建立稳定细胞系、Ｓｏｆｔｇ实验、细胞划痕实验、Ｔｌ实验和细胞骨架染色实验，检测ＨＳＰ９０Ｐ和ＦＡＫ被抑制后对乳腺癌ＭＤＡ－ＭＢ－２３。１细胞的生长和侵袭转移的影响研究结果：全长Ｗ及Ｈ个结构域突变体（蛋白Ｎ端－２３２１．成功构建ＨＳＰ９０Ｐ１片３３－６２０片断、Ｃ端６２＾７２４片断）的表达质粒

7、断、中端２。２．免疫共沉淀证实内源性和外源性的ＨＳＰ９０Ｐ与ＦＡＫ之间存在相互作－－用，免疫突光实验表明在ＭＤＡＭＢ２３１和Ｈ４细胞中，ＨＳＰ９０Ｐ与ＦＡＫ存在明显的共定位。３－６２０位氨基酸区间是与ＦＡＫ相互作用的主要结合．ＨＳＰ９０ｅ的第２３３Ｉ５５位点。４．ＦＡＫ通过蛋白酶体途径被降解，ＨＳＰ９０Ｐ能稳定ＦＡＫ蛋白避免其降解。－５－．ＦＡＫ的抑制剂ＰＦ５７３２２８和Ｈ排９０的抑制剂１７ＡＡＧ能明显抑制－－ＭＤＡＭＢ２３１细胞生长、迁移和侵數利用ＲＮ