egcg对hedgehogglil信号通路介导乳腺癌细胞侵袭转移能力影响的研究

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1、中图分类号密级EGCG对Hedgehog／Glil信号通路介导乳腺癌细胞侵袭转移能力影响的研究StudyofEGCGonInvasionandMetastasisofBreastcancercellsmediatedbytheHedgehog／GlilSignalingPathway计：学位论文：84页表格：20个插图：49幅李英华指导教师：张阳教授申请学位级别：博士学位学科(专业)：中西医结合临床培养单位：大连医科大学附属第二医院完成时间：二。一三年四月答辩委员会主席：JYlllllll2Illllf3fIJrlllllllUlllrf／17fl

2、fllf8pllfl7flrlll独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：二．茎丝孥签字日期：超!兰年上月一日关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允

3、许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√”)：1．保密口，在一年解密后适用本授权书。2．不保密口。作者签名：杰蓬鼙导师签名：日期：皿i乡年箩月)6日日期：≥Gl弓年s月)6日目录一、摘要⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5二、正文⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一9第一部分乳腺癌患者Hedgehog／Glil信号的表达与侵袭转移的关系(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．患者和组织标本⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．免疫组化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯103．结果评估标准⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯104．统计分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OODOO⋯⋯⋯⋯⋯OOBOO⋯⋯10(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OODO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101．乳腺癌原发组织中Glil表

5、达增加⋯⋯⋯000⋯⋯⋯⋯102．Glil表达与乳腺癌临床病理特征相关性分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯113．Glil核过表达预示着早期复发⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯134．复发转移乳腺癌及转移浅表淋巴结中Glil过表⋯⋯⋯⋯⋯165．Glil间质中过表达与乳腺癌复发转移相关⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18(五)总结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22第二部分Hedgehog／Gli1信号通路对乳腺癌细胞侵袭转移的影响(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯271．材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOD⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯271．1细胞株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯271．2主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OODO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯271．3主要试剂配制⋯⋯DOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯271．4主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯272．实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯282．1细胞培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯282．2细胞生长抑制实验(MTT法、)⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯282．3体外Transwell侵袭实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯282．4细胞划痕实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯292．5细胞粘附实验(MTT法)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯292．6免疫细胞化学染色⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯292．7RT—PCR⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯302．8Westernblot⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯312．9TUNEL法检测凋亡⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯332．10统计学处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯⋯341．Shh对乳腺癌细胞MCF一7、MDA．MB一231转移、侵袭及粘附的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯