自噬抑制剂减少禽呼肠孤病毒诱导的细胞及鸡胚组织凋亡

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2、＇－位级别：预瞭兽申请学；硕去学科专业名称．＼＼＼；！２０１５年６月３曰交日期：２０１５年５月论文答辩日期；；论文提曰，＾：２０１５学位授予单位：扬州大学学位授予日期年６月３０：。，《／‘、＂—＊珠：＞。．、答辩委员会主席：戴亚斌研究貢＞＂。？’一－－－‘一苗心‘尽苗一．一＾＾：讀托筵％￣儀务讀夫一—ｃ＜－：２。；；年６矜：式Ｖ：扩ｔ文又若一＇＂＇Ｖ＇＊￣＞＾＞ｖ＇：—＇．．秦＂＇＇？ｔ声若續、：荀寺满八聋聲＇－么琴每说杂皆＇心＞論自騰抑制剂减少禽呼肠孤病毒诱导的细舱及鸡胚组织调ｔｒｓ－ｍｅｄ乂

3、ｕｔｏｈａｉｎｈｉｂｉｔｏｒｅｄｕｃｅａｖｉａｎｒｅｏｖｉｒｕｓｉａ化ｄｐｇｙａｏｔｏｓｉｓｉｎｃｕｌｔｕｒｅｄｃｅｌｌｓａｎｄｉｎｃｈｉｃｋｅｎｅｍｂｒｏｓｐｐｙ研究生：段化鹏专业；预防兽医学导师：吴艳涛教授扬州大学兽區学院２０１５年６月段世鹏＝自隆抑制剂减少禽呼肠孤病毒诱导的细胞及鸡化组织调亡１自禮抑制剂减少禽呼肠孤病毒诱导的细胞及鸡胜组织调亡研巧生；段世鹏导师：吴艳涛教授（扬州，江苏扬州２２５００９大学兽医学院，）摘要禽呼肠孤病毒（ａｖｉａｎｒｅｏｖｉｒｕｓ，ＡＲＶ）感染可引起鸡和火鸡的病毒

4、性关节炎、脑鞭炎和免疫抑制，给养禽业造成重大损失。已证实ＡＲＶ感染能诱导细胞自嗦和调亡，且与ＡＲＶ一。病毒的致病作用有关，但如何降低诱导的细胞调ｔ有待进步研巧本研巧旨在探索自瞻抑制剂ＣＱ及Ｅ６４化趴ｐｓｔａｔｉｎＡ对ＡＲＶ诱导细胞调ｔ的影响。首先使用ＭＴＴ法检测两种自嘘抑制剂对ＡＲＶ诱导的细胞生长抑制的影响。结果显示，经两种自唆抑制剂预处理的ＤＦ１细胞感染ＡＲＶ后，病毒诱导的细胞生长抑制率显著降低。一作用后，ＡＲＶ诱导的ＤＦ１细胞融合病变显著进步经形态学观察发现，两种自隨抑制剂－。ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ双ＣＱ减少最后，使用門和染法进行流式细胞术

5、检测，结果显示，经＋或Ｅ６４ｄｐｅｐｓ化ｔｉｎＡ处理后，ＡＲＶ诱导的ＤＦ１细胞调亡率显著降低。化ｓａｓｅ－３的製解水平高低通常被认为是调亡发生强弱的标志ｅｓｔｅｒｎｐ。本实验采用ｗｂ－ｌｏｔ法检测ＡＲＶ（ＧＸ／２０１０／１株）感染的ＤＦ１细胞ｃａｓｐａｓｅ３活性，发现经ＣＱ或一Ｅ６４ｄ巧巧ｓｔａｔｉｎＡ预处理后，ＡＲＶ诱导的ＤＦ１细胞调亡率显著降低。进步进行病毒衣壳０Ｃ。蛋白表达检测及病毒滴度测定，发现两种自懂抑制剂均可显著降低病毒复制水平禽呼肠孤病毒可利用调亡使感染禽产生病理反应，鉴于两种自隨抑制剂可在细胞水一。ＣＱ化ｅｓ平抑制ＡＲＶ诱导的细胞调亡

6、，进步进行了动物实验使用或防４ｐｐ化ｔｉｎＡ对１１日龄鸡胚预处理后，接种ＡＲＶ病毒（ＧＸ／２０１０／１株），并设立对照组。收集尿囊液进行病毒滴度测定，病毒滴，发现经两种自旌抑制剂处理后度显著低于单独接毒组。收集组。ＣＱ或织样品进行蛋白检测，并统计鸡胚死亡率，绘制生存率曲线结果显示，一Ｅ６４（ＨｐｅｐｓｔａｔｉｎＡ均可显著抑制ＡＲＶ诱导的鸡胚法氏囊、也脏及肠组织细胞调亡，进步降低鸡胚死亡率。本研巧证明自座抑制剂ＣＱ和閒４ｄｆｐ巧ｓｔａｔｉｎＡ在抑制自嗟的基础上可显著抑制ＡＲＶ（ＧＸ／２０１（Ｖ１株）诱导的细胞调亡，降低病毒复制水平；对鸡胚，可显著降低Ａ

7、ＲＶ２段世鹏：自瞻抑制剂减少禽呼肠孤病辜诱导的细胞及鸡胚组织调亡（ＧＸ／２０１０／１株）导致的胚体死亡率。关键词：禽呼肠孤病毒；自隆抑制剂；ＣＱ；朗４ｄ＋ｐ巧ｓｔａｔｉｎＡ；调亡段世鹏＝自随抑制剂减少禽呼肠孤病毒巧导的细胞及鸡胚组织调ｔ至－ｍｅｄ乂ｕｔｏｐｈａｇｙｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｒｅｄｕｃｅａｖｉａｎｒｅｏｖｉｒｕｓｉａ化ｄａｏｔｏｓｉｓｉｎｃｕｌｔｕｒｅｄｃｅｌｌｓａｎｄｉｎｃｈｉｃｋｅｎｅｍｂｒｏｓｐｐｙＭ．Ｓ．ｃａｎｄｉ