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时间:2019-03-15
《硫酸镁防治人脐静脉血管内皮细胞放射损伤机制的初步探索》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、SOOCHOWUNIVERSITY硕士学位论文论文题目硫酸镁防治人脐静脉血管内皮细胞放射损伤机制____________________的初步探索__________________研究生姓名_____________徐华林___________________指导教师姓名_____________涂残___________________专业名称______________放射医学_________________研究方向_______福射^方护_________________论文提交日期___________
2、_2〇丨5年4月苏州大学学位论文独创性声明本人瓶师:臟交鮮錄魏本人4导震觀下,独立进行研究工備取得的成果。紋中已经注明引用的内容外,本论文不含其他个人或_3雛__■酿覷,也骑为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均己在文中以明确方式标明。本人承担本声麵法律難。*^论文作者签名:7難日期:M,4,2苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定,即:学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州
3、大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档,允许论文被查阅和借阅,可以釆用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属,在____年_月解密后适用本规定。非涉密论文^论文作者签名:轉科_____日期:_硫酸镁防治人脐静脉血管内皮细胞放射损伤机制的初步探索中文摘要中文摘要目的:探讨硫酸镁对人脐静脉血管内皮细胞(humanum
4、bilicalveinendothelialcell,HUVEC)照射后的存活率、DNA损伤和炎症反应的影响及其可能分子机制。方法:1.CCK-8法检测不同浓度的硫酸镁对HUVEC存活率的影响,筛选合适的硫酸镁工作浓度;克隆形成实验检测硫酸镁对HUVEC克隆形成能力的影响。2.激光共聚焦显微镜观察X射线照射后不同时间HUVEC中γ-H2AX簇集点(foci)的数量;流式细胞术和westernblot检测γ-H2AX蛋白的表达情况。3.实时荧光定量PCR方法检测ICAM-1、NF-κBmRNA的表达水平;流式细胞术和
5、细胞免疫荧光法检测ICAM-1蛋白的表达水平;westernblot法和细胞免疫荧光法检测NF-κB蛋白的表达水平。结果:1.CCK-8检测结果显示:硫酸镁1.25-6.25mg/mL浓度范围内对人脐静脉血管内皮细胞无毒性,且1.25mg/mL浓度的硫酸镁能提高照射后的细胞存活率,大于12.5mg/mL的硫酸镁对HUVEC表现出明显的增殖抑制作用;细胞克隆形成实验显示,12.5mg/mL及以上浓度硫酸镁抑制克隆的形成,1.25-2.5mg/mL浓度范围内硫酸镁可以减轻X射线对HUVEC克隆形成的抑制。2.细胞免疫荧
6、光法、流式细胞术、westernblot法证实γ-H2AXfoci焦点数在照后0.5-1h达到高峰,随着时间的延长foci点数变少,强度减弱,具有时间依赖性,1.25mg/mL硫酸镁作用后可以减少照后foci的数量,降低γ-H2AX蛋白表达水平。3.实时荧光定量PCR结果显示,X射线能增加NF-κB、ICAM-1mRNA的表达,而1.25mg/mL硫酸镁能有效降低其表达水平;流式细胞术和细胞免疫荧光法提示硫酸镁能够降低X射线引起的ICAM-1蛋白的增加;westernblot法和细胞免疫荧光法提示硫酸镁能够抑制NF
7、-κB的核转位。I中文摘要硫酸镁防治人脐静脉血管内皮细胞放射损伤机制的初步探索结论:1.一定浓度的硫酸镁能够增加照后HUVEC的存活率,减轻照射引起的DNA损伤。2.硫酸镁可能通过抑制NF-κBmRNA的表达,阻止NF-κB的核转位来降低ICAM-1mRNA和蛋白水平的表达,减轻炎症反应。关键词:人脐静脉血管内皮细胞;X射线;硫酸镁;γ-H2AX;NF-κB/ICAM-1作者:徐华林指导老师:涂彧教授崔凤梅副教授II硫酸镁防治人脐静脉血管内皮细胞放射损伤机制的初步探索英文摘要Theexplorationofthem
8、echanismMgSO4preventandtreattheradiation-inducedHUVECinjuryAbstractObjective:ToinvestigatetheeffectandpossiblemechanismofMgSO4oncells'survivalrate,DNAdamageandinflammatoryresponsei
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