水牛scap和srebp1基因的克隆、表达规律和多态性检测研究

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3、答辩日期２０答辩委员会主席石德顺研究员广西大学学位论文原创性和使用授权声明本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研巧成果。除己特别加标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大一学或其它单位的学位而使用过的材料。与我同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均己在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论

4、文的部分使用权，目Ｐ：学校有权保存并向国家有关部口或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播、。，可レッ采用影印、缩印或其它复制手段保存汇编学位论文本学位论文属于：□保密，在年解密后适用授权。巧＾保密。＂＂请在上相应方框内打Ｖ（）论文作者签名；日期：指导教师签名：日期：作者联系电话；电子邮箱水牛化ＭＰ和撕郎戶１基因的克隆、表达规律和多态性检测研究摘要固醇调节元件结合蛋白

5、裂解激活蛋白（ＳＣＡＰ）是位于内质网上一一的种膜结合蛋白，具有个固醇感受区域，能感应细胞内胆固醇水一平的变化１（Ｓ民ＥＢＰ１）是内质网上种膜；固醇调节元件结合蛋白一结合转录因子，受ＳＣＡＰ刺激盾能激活系列与脂肪酸合成相关酶的转录表达。ＳＣＡＰ和ＳＲＥＢＰ１共同维持细胞内固醇水平的稳态，在生物体脂质代谢过程中发挥着重要的作用。本研究レッ水牛ＳＣＡＰ和ＳＲＢＥＰ１为研巧对象，，初步探讨其与水牛产奶性能的关系首先进行基因的克隆并对其进行生物信息学分析；其次研究水牛和基因在不

6、同组织、不同泌乳期郭腺组织和高低产水牛奶中的表达；最后采用ＤＮＡ直接测序方法检测乂Ｓ化邸ｆ１基因的多态性位点一，为下步根据这些基因的多态位点筛选出与水牛产奶性状相关的ＳＮＰｓ标记打好基础，本研巧主要结果如下；１．ＳＣ４尸、况化公尸１基因的克隆根据Ｇｅｎｂａｎｋ上公布的牛乂基因（ＮＣ００７３２０巧日况化公戶１＿基因（ＮＣ００７３１７）设计引物进行克隆，经测序得到４２１４ｂｐ的ＳＣ４尸＿基因ｍ民ＮＡ序列４２１４ｂｐ，其开放阅读框为３８巧ｂｐ，和３９６１ｂｐ的Ｉ

7、棚￡公戶ｌ基因ＩｎＲＮＡ序列，其编码序列长３４３８ｂｐ；分析水牛ＳＣ４戶和汾祀公户１与牛、人、猪、绵羊、马、小鼠、大鼠、兔和狗ＣＤＳ同〇源性分别为９９％、９８％、８９％、９６％、８９％、８５／〇、８５％、８７％、〇〇〇〇〇〇〇〇８９／〇和９８／〇、８６％、８８／〇、９６／〇、８７／〇、７９／〇、８０／〇、８２／〇、８６％，并构建进化树分析得到水牛与牛进化距离最近，说明ＳＧ４戶和况祀公戶１在不同物种间具有保守性。２．化Ｌ４戶、汾？￡公戶１基因的ｍＲＮＡ表达水平研巧

8、、乂Ｐ。／／为参考基因，提取水牛屯、肺、肾、上皮、脾、卵巢、乳腺、脑、大肠、小肠、瘤胃、皱胃、瓣胃、肌肉、脂肪、淋己、肝、ｄ、ｄ、ｄ膜组织，泌乳７５０２８０水牛乳腺沮织，高产和低产水牛奶的ＲＮＡＰＣＲ１）．作为模板进行实时癸光定量，结果：（不同组织中，ＳＣ４Ｐ基因在乳腺中表达量最高，在淋己中表达量最低；没？￡公戶１基因在乳腺组织中的表达量最高，在肌肉中表达量最低，说明ＳＣ乂Ｐ和说化公户１基因与水牛现腺的功能相关，化：＾户