茶树leafy基因的克隆和表达分析

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1、园艺学报，2015，42(8)：1606–1616.ActaHorticulturaeSinica1606doi：10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0031；http：//www.ahs.ac.cn茶树LEAFY基因的克隆和表达分析11,*1112韩兴杰，徐玲玲，廖亮，李同建，邓辉胜，樊启水12（九江学院药学与生命科学学院，江西九江332005；江西修水茶叶研究所，江西修水332400）摘要：以茶树（Camelliasinensis）大叶且无蕾不开花的突变体‘大叶龙’及其母株为材料，通过同源克隆结合RACE-PCR方法，克隆了LEAFY（LFY）同

2、源基因的全长cDNA序列，两种序列分别命名为CsLFL1和CsLFL2，其cDNA全长分别为1448和1466bp，各自包含1191和1197bp的完整开放阅读框，编码396和398个氨基酸。它们与漆树科、无患子科以及壳斗目（山毛榉目）一些物种的LFY同源序列具有77%~79%的一致性，具有植物LFY成员作为转录因子的脯氨酸富集区、亮氨酸重复、酸性和碱性结构域以及保守的C–端等典型结构特征。系统发育分析表明，它们属于双子叶植物LEAFY分支，并且亲缘关系最近，说明两者的形成是发生在茶树物种进化过程中较晚期的复制事件。两种序列在正常开花母株及‘大叶龙’中没有区别，在母株花芽中强

3、烈表达，在母株和‘大叶龙’叶芽中有微弱表达。这些结果说明CsLFL1和CsLFL2代表了茶树中LFY的同源基因，并且可能参与茶树的成花启动过程。关键词：茶树；LEAFY；基因克隆；表达分析中图分类号：S571.1文献标志码：A文章编号：0513-353X（2015）08-1606-11CloningandExpressionAnalysisofLEAFYOrthologsfromTea11,*1112HANXing-jie，XULing-ling，LIAOLiang，LITong-jian，DENGHui-sheng，andFANQi-shui12（SchoolofPharm

4、acyandLifeSciences，JiujiangUniversity，Jiujiang，Jiangxi332000，China；XiushuiTeaResearchInstitute，Xiushui，Jiangxi332400，China）Abstract：Thisstudyclonedtwokindsoffull-lengthcDNAofLEAFY（LFY）homologsfromaflowerlessmutantwithlargeleavesCamelliasinensis‘Dayelong’andthemotherplantbyusingthehomologycl

5、oningandRACE-PCRtechniques，andthetwosequencesweredesignatedasCsLFL1andCsLFL2.Theycomprise1448bpand1466bp，withintactORFsof1191bpand1197bp，encodingpolypeptidesof396and398aminoacidresidues，respectively.Theypresent77%–79%similaritieswithLFYrepresentativesinspeciesfromAnacardiaceae，Sapindaceaean

6、dFagales，andcontainsuchtypicalstructuralfeaturesasproline-richregion，leucinerepeatregion，acidicandbasicdomains，andconservedC-terminuscharacteristicofLFYmembersastranscriptionfactors.PhylogeneticanalysisindicatesthattheybelongtotheLFYcladeofdicots，andtheyarethemostcloselyrelated，implyingthat

7、theyderivedfromduplicationoccurringinlaterstagesduringtheevolutionofC.sinensis.Moreover，therearenodifferencebetweenthesequencesfromthenormallyfloweringmotherplantandthemutant，whereastheyareexpressedstronglyinfloralbudsofthemotherplant，andalsoweaklyinleaf