松材线虫hox基因的克隆及表达特性研究

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1、密级ＵＤＣ５７９．Ｉ．．全曰制硕±学位论文ｍ－雷松材线虫ＨＯＸ基因的克隆及表达特性妍究作者姓名；巩雁婷指导教师；胡加付副教授＇Ｗ＾余红仕教授学科专业名称：微生物学研究方向：微生物分子生物学１所在学院；林业与生物技术学院｜＾论文提交＊日期；２０１５年６月－浙江农林大学二〇－五年六月－ZhejiangA&FUniversityDissertationfortheDegreeofMasterCloningandexpressionofHO

2、XgenesinBursaphelenchusxylophilusCandidate:GongYan-TingAdviser:HuJia-Fu,AssociateProfessorYuHong-Shi,ProfessorSpecialty:MicrobiologyDateofSubmission:June,2015ZhejiangA&FUniversityLin’an,Zhejiangprovince,P.R.ChinaJune,2015独创性声明本人声明，所呈交的学位论文，是受国家自然科学基金“松材线虫HOX基因的表达

3、调控机理（31270688）”项目资助，在指导教师指导下，通过我的努力取得的成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已经作了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果，也不包含在浙江农林大学或其他教育机构获得学位或证书而使用过的材料。与我一同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意。如被查有严重侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。学位论文作者亲笔签名：日期：论文使用授权的说明本人完全了解浙江农林大学有关保留、使用学位论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论

4、文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密，在年后解密可适用本授权书。□不保密,本学位论文属于不保密。□（请在方框内打“√”）学位论文作者亲笔签名：日期：指导教师亲笔签名：日期：摘要松材线虫病是由松材线虫引起的世界性检疫性病害，在我国严重发生。迄今为止，国内外对松材线虫开展了大量的研究，但在生殖发育方面，尚缺乏系统的研究。HOX家族是一类进化保守的发育调控基因，在胚胎发育和器官形成过程中具有重要的轴向调控作用。研究松材线虫HOX基因的表达调控机理，对于揭示松材线虫的生

5、殖发育具有重要的意义，是亟待解决的科学问题之一。本研究通过对松材线虫HOX基因的克隆、RACE全长序列分析、功能区域蛋白空间结构预测、原位杂交和功能验证等研究，取得以下五个方面的结论：一是首次明确了松材线虫HOX基因家族包括5个成员，分别为lin-39、mab-5、ceh-13、egl-5和php-3基因；二是获得了松材线虫5个HOX基因的全长序列，并在GeneBank登录，lin-39、mab-5、ceh-13、egl-5和php-3五个基因的登录号分别为KM891588、KM116504、KM116502、KM116

6、503和KM116505；三是明确了松材线虫HOX基因在基因组上的共线性（co-linearity）前后轴（anteroposterior(A-P)）排列顺序，依次为lin-39、mab-5、ceh-13、egl-5和php-3；四是预测了各基因功能区蛋白空间结构，其中lin-39、mab-5和ceh-13三个基因的功能区蛋白空间结构相同，且与egl-5和php-3基因存在一定的差异；五是明确了5个HOX基因在松材线虫不同发育时期和不同性别个体上的表达部位，即在松材线虫的成虫期，5个基因在雌雄虫的生殖器部位都有表达，ph

7、p-3基因在尾部也有表达，在J4和J2期所有基因都不表达，在J3期，lin-39、mab-5、ceh-13和egl-5在身体大部都有表达，但php-3基因只在尾部表达，在卵期的表达部位差异较大；关键词：松材线虫；松材线虫病；HOX基因；表达调控ⅠABSTRACTPinewiltdisease(PWD)isaquarantinediseasecausedbypinewoodnematode,Bursaphelenchusxylophilus,damagingseveralpinetreespeciesinworldwide

8、withparticularrespectinChina.NumerousstudiesonB.xylophilushavebeendoneinmanyaspectsliketaxology,rapididentification,geneticsandbehaviourecology,however,litteis