适于动物临床应用的蛋黄卵磷脂制备工艺研究

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1、AGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI硕士学位（毕业）论文适于动物临床应用的蛋黄卵磷脂制备工艺研究学位申请人：李硕绵指导教师：董世山教授学科专业：基础兽医学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二O—五年五月二十七日分类号：S852.3单位代码：10086密级：公开学号：2012353适于动物临床应用的蛋黄卵磷脂制备工艺研究Theprocessresearchonpreparationofeggyolklecithinsuitableforanimalclinicalapplication学位申请人：李

2、硕绵指导教师：董世山教授学科专业：基础兽医学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年五月二十七日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研宄成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文屮不包含其他人己经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得河北农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。7^学位论文作者签名：签字曰期：>�一年《月丨日.学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解河北农业

3、大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被査阅和借阅。本人授权河北农业大学可以将学位论文的全部或部分内容编入右关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：气导师签名：办签字日期：純年‘月/日签字日期：年‘月/日学位论文作者毕业后去向：工作单位：电话：由名-/扁通讯地址:摘要在饲料中添加卵磷脂可提高动物的生产性能，但卵磷脂的价格过高会增加养殖成本，减少经济效益。蛋黄是工业制备卵磷脂的重要来源，我国鸡

4、蛋产量位居世界首位，鲜鸡蛋蛋黄中含有丰富的卵磷脂，其含量约为蛋黄总重量的9.76%，且蛋黄卵磷脂中磷脂酰胆碱（PC）的含量约是大豆卵磷脂的三倍。但相较大豆卵磷脂，蛋黄卵磷脂含有较多的胆固醇，机体摄入过多的胆固醇会影响健康。一些卵磷脂的制备工艺引入丙酮、乙醚等有毒溶剂也有一定的安全隐患。本试验主要探讨了蛋黄卵磷脂的制备方法，以建立低成本、无有毒溶剂残留、无胆固醇、简单、高效、经济、适合规模化生产蛋黄卵磷脂工艺流程为目的，从蛋黄卵磷脂的粗提、甘油三脂的去除、胆固醇的去除以及蛋黄卵磷脂的精制四个方面进行了研究。首先，根据卵磷脂易溶于乙醇的特

5、性，将卵磷脂从蛋黄液中提取出来。乙醇提取蛋黄卵磷脂的工艺受提取温度、提取时间、乙醇浓度以及料液比的影响，本试验通过单因素实验考察了四种因素对蛋黄卵磷脂提取率的影响，并通过正交试验确定了提取时间和提取温度是影响蛋黄卵磷脂粗提的主要因素，且最佳的工艺条件为提取时间60min、提取温度35℃、乙醇浓度95%、料液比1:12，蛋黄卵磷脂粗制品的得率为25.18%。其次，通过低温冷结晶法去除蛋黄卵磷脂中大部分的甘油三脂。将蛋黄卵磷脂的乙醇溶液在4℃下静置过夜，溶液中的甘油三脂在低温下会结晶沉淀出来，离心后可将大部分甘油三酯去除，检测前后蛋黄卵磷

6、脂中甘油三脂的含量，可计算出甘油三酯的去除率为58.96%。之后，对应用β-环糊精脱除蛋黄卵磷脂中胆固醇的工艺条件进行了研究。先配制β-环糊精的饱和溶液再与蛋黄卵磷脂的乙醇溶液混匀，利用β-环糊精的包埋吸附作用去除胆固醇，并研究吸附剂剂量、吸附温度以及吸附时间等因素对胆固醇去除效果的影响，采用薄层色谱法和皂化比色法定性和定量检测胆固醇。结果发现β-环糊精对胆固醇有良好的去除效果，操作简单、适合工业化生产，10g鲜蛋黄液可使用1.6gβ-环糊精将其中含有的胆固醇去除，去除率为99.00%。最后，将去除大部分甘油三酯和脱胆固醇后的蛋黄卵磷

7、脂进一步精制。蛋黄卵磷脂的等电点为pH=6.7，在其等电点可发生沉淀，因此可利用缓冲液对蛋黄卵磷脂进行精制，通过对三种缓冲液的选择，确定了使用1/15mol/L的磷酸缓冲液，配制成pH=6.7的溶液与蛋黄卵磷脂的乙醇溶液以1:2的比例混合，可得到纯度为81.32%的蛋黄卵磷脂，其中PC含量为56.14%，PE含量为25.18%。关键词：蛋黄；卵磷脂；提取；β-环糊精；胆固醇Theprocessresearchonpreparationofeggyolklecithinsuitableforanimalclinicalapplicati

8、onMasterCandidate：LiShuomianSpecialty：BasicVeterinarySciencesAdvisors：ProfessorDongShishanAbstractLecithincani