游离脂肪酸诱导大鼠心肌细胞h9c2凋亡机制的初步探究

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1、．．．．？．，．．．．１０４２２８１单位代码：分类号；Ｑ密级：学号Ｓ２０１２Ｈ７０６＾乂《雜ＳＨＡＮＤＯＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕±学位论文ＴｈｅｓｉｓｆｏｒＭａｓｔｅｒＤｅｇｒｅｅ（专业学位）？－－．论文题日：游离脂肋酸诱导大鼠心肌细胞Ｈ９ｃ２调亡机制的初步探究Ｒｅｓｅａｒｃｈ－ｏｎｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆＦＦＡｉｎｄｕｃｅｄＨ９ｃ２ｃｅｌｌａｐｏｐｔｏｓｉｓ、＇－＇＿￣．ｒ一．作者姓名常芬—；．芦

2、；．‘ｔ培养单化生命科学学院：专化名称生物工程巧指导教师尹德领Ｓ合作导师Ｉｌｌ—Ｉ——Ｉ１－—■？■Ｉ—２０１５年４月１４日分类号渝１单位代码１０４２２密级学号如心／７〇＆ＳＨＡＮＤＯＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕±学位论义ＴｈｅｓｉｓｆｏｒＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅｇ（专业学位）论文醒目：韦妍诚。鄰滅納〇如巧鍊雕腑臉如例納切咬巧满ｊ’‘Ｒｅｗｏｂ－ｈ０。却Ｃｍｏｋｃｕ（肿ｍｅｃｆｉ口０／口巧Ａ＇。沁如ｆ＇助！〇１７〇７｜〇３＜５｜｜作者窜

3、名专业么娩王獲导心乎懲绞麵絶合作导贿＞化年作月曰ｆ千原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名；名日期：如妳佛译关于学位论文使用授权的声明本人同意学校保留或向国家有关部口或机构送交论文的印刷件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可Ｗ将本学位论文的

4、全部或レ部分内容编入有关数提库进行检索，可ッ采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定（）论文作者签名：窜名导师签名期；公遂目录中＾要１：：摘ＡＢＳＴＲＡＣＴ５缩略词表９前言１１１．脂肪酸与游离脂肪酸１１１１２．代谢综合征与游离脂肪酸３．７跨膜受体与游离脂肪酸１２１３４．栋禍酸５．Ａｒｒｅｓｔｎ１３ｉ家族５．１Ａｒｒｅｓｔｉｎｓ与７ＴＭＲＳ脱敏１４５Ａｎｒｅｓｉ．２ｔｎｓ与７ＴＭＲＳ内化巧５．

5、３Ａｒｒｅｓｔｉｎｓ与７ＴＭＲＳ泛素化１５－５４Ａｒｒｓｔｉ２７ＴＭ化１５．ｅｎ与相关信号通路ｐ６．ＰＡ与Ｔｏｌｌ样受体化７．Ａｋｔ１７８－．ＧＳＫ３３１８９．细施调亡１９９．１外源性途径２０９．２内源性途径２０实验材料和方法２３１２３．实验材料２．试剂和耗材２３２６３．仪器设备４．主要溶液及试剂祀方２７４Ｈ９ｃ１１．１２细胞培养用试剂及配方４．２横Ｂ（Ｓｕ化ｒｈｏｄａｍｉｎｅＢＳＲＢ３０蘭罗丹明，）染色法用试剂及配方４３Ｈ

6、ｏｅｃｈ巧３３２５８染色３０．用试剂及配方４．４大肠杆菌转化、培养、冻存用试剂及配方３１４．５核酸电泳用试剂及配方巧４．７ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ实验用试剂及配方巧４．８转膜所用试剂及配方３４３７５．实验方法５．１细胞培养３７５．２ＳＲＢ检测细胞存活率巧５３Ｈｏｅｃｈｓ３３巧８４０．ｔ细胞核染色观察细胞调亡率４０５．４流式细胞仪检测细胞调亡率５５ＷｅｓｅｒｎＢｏ４１．ｔｌｔ实验－４４５．６ＲＴＰＣＲ验ｑ实８５．７质粒转染４５乂ｓｉＲＮＡ４９转染４９

7、５．９免疫羡光ｔｌＯ免疫共沉淀５０５１５．１１统计学分析实验Ｓ果５３１ＰＡＨ；５３．Ｗ浓度梯度依赖的方式抑制９ｃ２细胞存活率。２．ＰＡＷ浓度梯度依赖的方式诱导Ｈ９口细胞调亡的发生。５３３ＰＡＨ９ｃ２－ｒｒｔｉｎ２．诱导细胞调亡过程中，ｐａｅｓ蛋白含量发生下调，并且５３具有显著的时间梯度和浓度梯度依赖性。－４．在ＰＡ诱导Ｈ９口细胞调亡过程中，ａｒｒｅｓｉ化２的ｍＲＮＡ含量并无明Ｐ显变化。５４５－５４．过表达外源性Ｐａｒｒｅｓｔｉｎ２促进了ＰＡ诱导的Ｈ９口细胞调亡。．．．．．．．６Ｐ

8、ｋｔ－６ＳＫｓｅｒ－．在Ａ诱导的Ｗｃ２细胞调亡过程中，Ａ的正常活化受阻，ｐ（９无变化。５