小麦胚多芽诱导体系的建立及农杆菌介导幼胚愈伤转化的研究

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1、分类号：S512.1学校代码：10712UDC：602研究生学号：2013051603密级：公开灶衣林奇祆大学2015届全日制硕士专业学位研究生学位论文小麦胚多芽诱导体系的建立及农杆菌介导幼胚愈伤转化的研究学科专业生物工程研究方向小麦转基因研究生丁宽指导教师张小红副教授完成时间2015.5____中国陕西杨凌研究生学位论文的独创性声明本人声明：所呈交的全日制碩士专业学位论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，如果违反此规定，一切后果与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加

2、以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年<月文曰论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结果，属于我现岗职务工作的结果，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我愿接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。导师签名:关于研究生学位（毕业）论文使用授权的

3、说明本学位（毕业）论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕业）论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，将以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，愿意按《中华人民共和国著作权法》等有关规定接受处理并承担法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人(包括研究生本人)未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文

4、进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保存、汇编论文）研究生签名：时间：>/夕年<月r曰导师签名：时间：上年/月j曰Classificationcode:S512.1Universitycode:10712UDC:602Postgraduatenumber:2013051603Confidentialitylevel:PublicThesisforProfessionalMaster’sDegreeNorthwestA＆FUnive

5、rsityin2015THEESTABLISHMENTOFMULTIPLESHOOTINDUCTIONSYSTEMBASEDONEMBRYOOFWHEATANDTHESTUDYOFAGROBACTERIUM-MEDIATEDTRANSFORMATIONOFIMMATUREEMBRYOCALLUSMajor:BiologicalEngineeringResearchfield:WheatGeneticTransformationNameofPostgraduate:DingKuanAdviser:ZhangXiao-hongDateofsubmission:2015.05YanglingSha

6、anxiChina小麦胚多芽诱导体系的建立及农杆菌介导幼胚愈伤转化的研究摘要小麦的离体培养与再生相对于水稻、玉米等比较困难，虽然幼胚是最为理想的外植体材料，但是合适的取材时期非常短促且难以把握。因此可以利用材料来源更为方便的小麦成熟胚以及有应用前景的大龄幼胚进行多芽诱导培养，建立起小麦胚的多芽诱导体系，为小麦的转基因研究奠定基础。小麦转基因的方法中，农杆菌介导法是一个天然的转化系统，与基因枪法相比具有简单、经济、单拷贝整合等多方面的优势，但是影响农杆菌转化效率的因素有很多，在小麦的转化中至今仍是一个难题。本试验以不同基因型小麦的成熟胚以及大龄幼胚作为多芽诱导培养的外植体，通过研究植物激素TD

7、Z和6-BA对小麦成熟胚和大龄幼胚多芽诱导的影响，旨在建立小麦胚的多芽诱导体系。其次，本研究以13个小麦品种的幼胚愈伤为受体，通过比较GUS基因的瞬时表达率，以筛选对农杆菌敏感的小麦基因型，并对转化过程中的菌液浓度和侵染时间进行了比较研究，为建立小麦农杆菌转化体系提供参考。本试验主要得到了以下主要结论：（1）利用小麦成熟胚和授粉后18天左右的大龄幼胚在附加TDZ和6-BA的培养基上经过10周的诱导培养，初步建